乳及乳制品中阪崎肠杆菌PCR-DHPLC检测新技术的建立.PDFVIP

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2017-04-26 发布于湖北
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乳及乳制品中阪崎肠杆菌PCR-DHPLC检测新技术的建立.PDF

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乳及乳制品中阪崎肠杆菌PCR-DHPLC检测新技术的建立

微生物学通报 NOV 20, 2008, 35(11): 1845~1849 Microbiology ? 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 生物实验室乳及乳制品中阪崎肠杆菌 PCR-DHPLC 检测新技术的建立杨春华1 曹际娟2* 桂家祥1 钟毅1 (1. 江西出入境检验检疫局南昌 330002) (2. 辽宁出入境检验检疫局大连 116001) 摘要: 为了应用 PCR 结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中阪崎肠杆菌的快速检测方法, 根据阪崎肠杆菌 16S-23S rRNA 特异基因序列的特点设计特异性引物, PCR 扩增的产物经 DHPLC 技术进行快速检测。以阪崎肠杆菌等 59 株参考菌株做特异性试验; 阪崎肠杆菌菌株稀释成不同梯度, 做灵敏度试验, 结果表明该方法具有很好的特异性, 方法灵敏度较高, 检测低限可达到为 25 CFU/mL; 该方法可以快速、准确检测阪崎肠杆菌, 是食品中致病菌快速检测的新技术。关键词: DHPLC, 阪崎肠杆菌, 16S-23S rRNA Construction of Identification of Enterobacter sakazakii in Milk and Diary Product with PCR-DHPLC YANG Chun-Hua1 CAO Ji-Juan2* GUI Jia-Xiang1 ZHONG Yi1 (1. Jiangxi Entry-Exit Inspection Quarantine Bureau of P.R.China, Nanchang 330002) (2. Liaoning Entry-Exit Inspection Quarantine Bureau of P.R.China, Dalian 116001) Abstract: To identify the 16S-23S rRNA gene in Enterobacter sakazakiis, a PCR-DHPLC assay was per- formed in this study. Primers specific for the 16S-23S rRNA gene of Enterobacter sakazakii in food were selected to conduct the DHPLC assays. The specific testing was performed with Enterobacter sakazakii and 59 strains, and various grads of Enterobacter sakazakii was used for the sensitivity testing. The good speci- ficity was found in the study. Also, the method showed nicer sens