胡杨质膜的纯化及其活性的研究！.PDFVIP

###；+-（8） 生物化学与生物物理进展 %./01 23/45(61 23/758’1 · 8%6 · 胡杨质膜的纯化及其 ! ! #$%’( 活性的研究! 张 玲!） 刘群录） 黄有国!）!! （!）生物大分子国家重点实验室，中国科学院生物物理研究所，北京 !##!#!） （）中国林业大学生物学院，北京 !###$%） 摘要 用 ’()*+, -./##，012 %%/# 两相分配法分离并纯化了悬浮培养的 胡 杨 细 胞 质 膜 3 不 同 聚 合 物 浓 度 （/4 /5、/4 65、/4 75、84 !5、84 %5、84 /5）和 9:; 浓度（#、/、!#、!/ =; ?）对分离效果影响的研究 结果表明，采用聚合物浓度为 /4 75和无盐存在的两相分配体系可获得纯度较高的胡杨细胞质膜 3 纯化的质膜 @ A .B-0+C’ 的活力提高 $ 倍，且酶定向程度较高，这为进一步研究胡杨细胞质膜特性及获得高纯度 @ A .B-0+C’ 提供了良好基础 3 关键词 质膜，两相分配法，@ A .B-0+C’ 学科分类号 D6%，D/! 大片土壤的盐碱化是一个备受关注的紧迫而现 ) 材料与方法 实的问题，因而人们致力于研究植物抗盐机理以期 提高作物的抗盐性获得高耐盐性植株 3 植物的盐胁 ) * ) 试剂 迫主要指生长在高浓度 E+:; 环境中，E+ A 、:; F 会 ’()*+, -./##， 0G+*+HI+ 产 品；聚 乙 二 醇 降低水势，植物必需经过渗透调节才能维持膨压和 %%/#（ J=;K’)GK;’,’ L;KH=; %%/#， 012 %%/# ） 和 正常生长 3 一方面 E+ A 、:; F 聚集到液泡里，另一 -*I)=, M.!##， NIL+ 产 品； 二 硫 苏 糖 醇 方面大量 E+ A 、:; F 外排，这一过程耗能，依赖质 （OI)GI=)G*’I)=;，- -）和 -*IC，0*=’L+ 产品；苯 膜 @ A .B-0+C’ 功能的发挥 3 质膜 @ A .B-0+C’ 利用 甲基磺酰氟（JG’,K;’)GK;CP;Q=,K;Q;P=*IO’，0RNS） 水解 B-0 产生的能量把质子从细胞内泵到细胞外， 和 @101N，TI==; 产品；B-0，S;PU+ 产品；十二 产生跨膜质子梯度和膜电位 3 E+ A @ A 反向转运体 烷 基 硫 酸 钠 （ C=OIP O=O’HK;CP;Q+)’， NN ）， 依靠跨膜质子动力势把 E+ A 运向细胞外，:; F 则顺 TI=)’HG 产品；聚 乙 烯 吡 咯 烷 酮（J=;KVI,K;JK**=;I. 膜电位通过离子通道外排 3 植物能在高盐条件下生 O=,’，0W0），TBNS 进口分装；其他试剂均为国产 存，与质膜 @ A .B-0+C’ 的功能密切相关 3 分析纯 3 有关植物细胞质膜或包括质膜 @ A .B-0+C’ 在 ) * + 材料 内的膜蛋白（或膜酶）的结构和功能与植物抗盐性 悬浮培养的胡杨细胞由中国林业大学提供［］3 的研究，迄今仅对禾本科植物开展了研究［!］，但 ) * , 微粒体的制备 进展缓慢 3 而对木本植物细胞膜的研究，尚未见报