荧光免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速检测单增李斯特菌_张赛论述.pdf

网络出版时间：2014-10-30 17:24 网络出版地址：/kcms/detail/44.1620.TS1724.006.html 基金项目：“十二五”国家科技支撑计划项目（2012BAK08B07）；国家发改委创新平台建设资助项目（发改高技[2011]2041 号） 作者简介：张赛（1987-），男，硕士研究生，研究方向：食品安全检测 通讯作者：何小维（1959-），男，教授，博士生导师，研究方向：功能碳水化合物材料理论与技术 荧光免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速检测单 增李斯特菌 张赛 1, 2，何小维 1，刘晓云 2，彭运平 2，李文美 1, 2 （1.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州，510640） （2.广州万孚生物技术股份有限公司自???型快速诊断国家地方联合工程实验室，广东广州，510663） 摘要：为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法，本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备 免疫磁珠；以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠 IgG 为标记抗体，抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗 分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离与荧光免疫层析法相结合应用于单增李斯特菌的现场快速 检测中。结果表明：荧光免疫层析试纸条对纯培养单增李斯特菌的检测限为 4×105 CFU/mL，联合检测方法 10 倍、100 倍浓缩 时，检测限分别为 4×104 CFU/mL 和 1×104 CFU/mL。联合检测体系特异性较好，与实验室保存的 10 株细菌无交叉反应。人工污 染样本检测限为 1×104 CFU/mL，同纯培养物相比检测灵敏度并没有降低。本方法的建立对于食品中单增李斯特菌的现场快速检 测具有重要意义。 关键词：单增李斯特菌；抗体；免疫磁珠；荧光免疫层析；快速检测 Rapid Detection of Listeria monocytogenes Using Fluorescence Immunochromatographic Assay Combined with Immunomagnetic Bead Separation ZHANG Sai1, 2, HE Xiao-wei1, LIU Xiao-yun2, PENG Yun-ping2, LI Wen-mei1, 2 (1. College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) (2. National Local United Engineering Lab of Rapid Diagnostic Test, Wondfo Biotech Co. , Ltd. , Guangzhou 5l0663, China) Abstract: In order to found a simple, rapid, sensitive