转座子插入敲除解释.pptx

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转座子(transposon)是存在于DNA上可自主复制和移位的基本单位。 由Barbara McClintock 在20世纪40年代首次从玉米中发现,从此改变了人们对基因组序列稳定性的认识,打破了遗传物质在染色体上呈线性固定排的传统理论。 1983年McClintock因发现转座子被授予诺贝尔奖;特点:;转座子类型: ;转座机制: ;插入突变;睡美人转座子(sleeping bueaty,转座子SB)已证明在小鼠和人细胞中可以激活,转座子插入新的位点后,该位点附近的基因即受到抑制呈现隐性的“睡美人”表型。 一旦转座子在转座酶的作用下从这一位点上转走,该位点的基因隐性表型又恢复为显性表型,即“睡美人苏醒”。调控转座酶和转座子活性的系统称为青蛙王子(Frog Prince)。 用特异的开放阅读框捕获技术,可以使自然散在的转座酶编码基因高表达,人为催化激活转座子使其苏醒,执行插入、切除等任务。目前已经应用于微生物、昆虫、植物、动物及人类基因组功能的研究。例如蛙类基因组含有Tcl水手转座子超家族,呈自然失活状态,转座酶与转座增强子序列末端结合,在HMGBI蛋白协助下,激活转座子,使睡美人转座子苏醒。 ;使用转座子进行插入突变的优点有: ;随着基因敲除技术的发展,早期技术中的许多不足和缺陷都已经解决,但基因敲除技术始终存在着一个难以克服的缺点,即敲掉一个基因并不一定就能获知该基因的功能,其原因包括: 一方面,许多基因在功能上是冗余的,敲掉一个在功能上冗余的基因,并不能造成容易识别的表型,因为基因家族的其他成员可以提供同样的功能; 另一方面,对于某些必需基因,敲除后会造成细胞的致死性,也就无法对这些必需基因进行相应的研究了

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