染色體G显带技术及其原理.pptVIP

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染色体G显带技术 及其原理 ;染色体G显带核型图;实验原理 (1);实验原理(2) ; Giemsa染料的发明者:Gustav Giemsa;实验原理 (3);;实验原理 (4);实验原理 (5);实验原理(6);实验原理(7);;;;; ;实验用品(1);实验用品(2);实验用品(3);2.5%胰蛋白酶原液的配制: 胰蛋白酶粉末(1:250)2.5g,100ml 生理盐水,过滤除菌,分装成1ml小瓶于 -20℃保存,用于消化细胞和染色体G显带标本的制作。;生理盐水的配制 氯化钠(NaCl)8.5g,加三蒸水至1000ml,用溶液瓶分装,高压灭菌9 磅,10分钟,可用于细胞培养。 ;Giemsa存储液的配制 Giemsa粉末1g加少许甘油混合研碎→共计加入甘油66ml,充分混匀→倒入烧杯中在55~60℃水浴中加热2小时→冷却→加入甲醇66ml,充分混合→在室温中静置2~3周,过滤贮存于棕色瓶中,可长期使用。 ; 1/15mol/L 磷酸缓冲液(Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制 甲液:1/15mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4 ?????????????????? 9.465g 蒸馏水????????? ??????????加至1000ml 乙液:l/15mol/L KH2PO4溶液 KH2P04???????????????????? 9.07g 蒸馏水??????????????????? 加至1000m1 分装在瓶内,于室温保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液。 ;pH;2×SSC溶液的配制 用分析天平称取氯化钠17.53克,柠檬酸钠8.82克溶于蒸馏水中,加蒸馏水至1000毫升。;实验方法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(二)胰蛋白酶-EDTA法 ;(二)胰蛋白酶-EDTA法 ;(二)胰蛋白酶-EDTA法 ;(三)ASG(Acetic-saline-Giemsa)法 ;注意事项;影响G显带的一些因素(1);影响G显带的一些因素(2);影响G显带的一些因素(3);影响G显带的一些因素(4);影响G显带的一些因素(5);影响G显带的一些因素(6);染色体G显带失败标本的补救方法(1);染色体G显带失败标本的补救方法(2);染色体G显带失败标本的补救方法(3);谢谢!

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