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2xPCRMasterMix
22xx PPCCR MR Maasstteer Mr Miixx
4 ml W LA046a
仅用于科学研 究,不能用于诊断
产 品信息
产 品名称 2x PC R Master Mix
产 品概述 2x PC R Master Mix中含有2xTaq D NA Poly merase , 2x PC R Buffer , 2xd NT P , 只需加入适量 引物 、模板和水即可
进行PC R扩增 。大大简化 了PC R操作,使操作更加快捷,也减少了PC R操作过程 中可能导致 的污染,使PC R的重复性
更好 。利用2x PC R Master Mix可 以进行各种 常规 的PC R扩增,特别适合用于定量和半定量 的PC R扩增, 以及2kb以
下DNA片段 的T载体克 隆。
本试剂盒用于50μl的PC R反应体系,足够用于160个反应,用于20μl的PC R反应体系,足够用于400个反应 。
包装信息
试剂名称 W LA046a 保存条件
2x PC R Master Mix 4x 1ml -20℃
注意事项 1. 由于PC R反应非常灵敏可以扩增 目的基 因序列超过1000万倍 , 在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增D NA 的污染,
并尽量考虑设置不加模板 的空 白对照以确认是否有待扩增D NA的污染 。
2. 为了您 的安全和健康 , 请穿戴实验服并戴一次性手套操作 。
操作流程 1. PC R反应体系设置 :
a. 溶解并混匀PC R反应所需的各种溶液,将2x PC R Master Mix置于冰浴上或冰盒 内。
b. 参考下表在冰浴上设置PC R反应:
试剂名称 最终浓度 体积 体积
灭菌双蒸水 - (21-x)μl (8.4 -y)μl
模板DNA 10 pg-1μg* xμl yμl
引物混合物(10μM each) 0.8μM 4μl 1.6μl
2x PC R Master Mix 1x 25μl 10μl
总体积 - 50μl 20μl
c. 用移液器轻轻吹打或轻微Vortex混匀,室温离心数秒 。
d. 将设置好的PC R反应管置于PC R仪上,开始PC R反应 。
2. PC R反应参数 的设置可以参考如下示例:
ST EP1(起始变性):94℃ 3min
ST EP2(变性):94℃ 30s
ST EP3(退火):55℃ 30s
ST EP4(延伸):72℃ 1min
ST EP5(循环):Go To ST EP2 for 30 cycles
ST EP6(最终延伸):72℃ 10 min
ST EP7( 临时保存):4℃ forever
a . PC R反应 的设置需根据模板
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