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EMSA探针生物素标记试剂盒
EMSA 探针生物素标记试剂盒
产品编号 产品名称 包装
GS008 EMSA探针生物素标记试剂盒 20次
1115
产品简介:
? EMSA探针生物素标记试剂盒(EMSA Probe Biotin Labeling Kit)是一种通过Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT)把生
物素标记的dUTP添加到单链DNA 3’末端,然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3’末端被标
记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。
? Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3’-OH端加上dNTP的反应。关于
TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3’端突出的双链DNA要比平端或3’端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链
DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3’末端加NTP的反应。
? 本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。
? 本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。
? 如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
GS008-1 TdT Buffer (5X) 250μl
GS008-2 TdT (10U/μl) 20μl
GS008-3 Biotin-11-dUTP (5μM) 100μl
GS008-4 Biotin-Control Oligo (0.4μM) 100μl
GS008-5 Ultrapure water 1ml
GS008-6 探针标记终止液 200μl
GS008-7 TE 15ml
GS008-8 退火缓冲液(10X) 150μl
— 说明书 1份
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
? 需自备用于检测探针标记效率的带正电荷尼龙膜,以及用于生物素检测的相关试剂。带正电荷尼龙膜(FFN12/FFN16)可
以向碧云天订购。相应的用于生物素检测的化学发光法EMSA试剂盒(GS009)也可以向碧云天订购。
? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 准备工作:
A. 取出TdT Buffer (5X)、Biotin-11-dUTP和Ultrapure water溶解,并置于冰浴上备用。
B. 取出待标记的单链EMSA探针,用水稀释至1μM,并置于冰浴上备用。如果待标记的EMSA探针为双链,95℃加热2
分钟,然后立即放置到冰水浴中,使双链的EMSA探针转变为单链的探针,然后同样用水稀释至总的单链DNA浓度为
1μM,即每条单链的浓度为0.5μM,
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