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TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD
版本号: FP121221
二 PCR检测
HotMaster Taq DNA聚合酶与其他热启动Taq酶不同之处是不需要热激活处理，缩短了 RealMaster Mix (SYBR Green)
整个PCR所需时间。对于大多数模板，起始的解链过程只需94-95℃ 1-2 min。如果模板的
GC含量很高，则起始解链过程时间需延长至10-15 min，为得到最佳结果，对不同的模板可 目录号：FP202
采用梯度PCR优化反应条件。
注意：HotMaster Taq DNA聚合酶的延伸温度范围是60-70℃，最佳延伸温度为68℃。
反应步骤（建议）
产品内容
循环 步骤 温度 时间 内容
1× 1 94-95℃ 1-2 min* 起始模板变性 FP202-01 FP202-02
产品组成
35-45× 2 94-95℃ 10-20 sec PCR循环中模板变性 50 μl×50 rxn 50 μl×200 rxn
3 50-60℃ 10-30 sec 退火 2.5×RealMaster Mix
℃ 延伸 1 ml 4×1ml
4 68 10-60 sec （with ROX）
* 解链时间的长短与模板的长度和GC含量有关
20×SYBR Solution 150 μl 600 μl
储存条件
该试剂盒在4℃可储存3个月。若要长时间储存，请将2.5×RealMaster Mix
（with ROX）与20×SYBR Green置于-20℃避光保存。将20×SYBR solution加入
至2.5×RealMaster Mix 后，可在-20℃储存3个月以上。如果RealMaster Mix解冻后
没有使用，必须彻底混合均匀后才能重新冷冻；因为在解冻过程中盐会出现分层现
象，未混匀进行冷冻，盐晶体的析出将会对酶造成损害。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
产品简介 操作步骤
本产品适用于SYBR Green法进行模板的荧光定量PCR检测，RealMaster Mix中提供 一 SYBR检测方法：
了一种独特的 酶（已获???专利），我们命名为 聚合酶（包含在
Hot-start HotMaster Taq DNA 请注意将2.5×RealMasterMix和20×SYBR solution避光保存。
2.5×RealMaster Mix中），该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于，一般的Hot-start 酶只在第
1. 20×SYBR solution在室温下平
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