侧翼序列克隆方法评价.pdf

维普资讯 分??植物育种 ，????年，第 ?卷，第 ?期 ，第 ???—???贞? ? ???????????????????????，????，???．?，??．?，???—???? 新 思路 、新技术 、新方法? ??????????????＆ ??????????? 侧翼序列克 隆方法评价? 洪登 峰 万丽 丽 杨光 圣? 中农业大学作物遗传 改良国家重点实验室，国家油菜 改良?武汉?中心，武汉，??????? 通讯作者，???????????．????．???．??? 摘? 要 克隆已知序列的侧翼 ???区域是基因操作实验 中经常面临的任务之一。 自???技术发明以来，? 以其 为基础 克隆侧 翼序 列的方法 不断开发 ，如反 向 ????????????????、捕捉 ????????????????、??????????? ???、抑制 ????????????????????、?接头 ?????—???????????、多功 能接头 ??????????????????????????】、???? ???、热不对称交错 ????????????????????????????????????????????步行一复性控制引物???????????????? ????????????????????????等。本文对上述方法的原理进行了简要的概括和总结，据此将其归为三大策略，即连? 接成环 ???、外源接头介导 ???和半随机引物 ???。对不同的策略和同一策略中不同的方法的优缺点亦进? 行了比较，进而讨论和展望了它们 的主要应用领域和潜力，以期对实际操作起到借鉴作用。? 关键词 侧翼序列，连接成环 ???，外源接头介导 ???，半随机引物 ???，?接头 ???，热不对称交错 ???，? ??? 步行一 复性控 制 引物? ????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????? ? ???????? ???????????????? ?????????????????????????????????????????????????，???????????????????????????????????????????????????，?????，??????? ????????????????????，???????????．????．???．??? ????????? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?