兽用疫苗保护剂和佐剂资料.ppt

兽用疫苗冻干保护剂 和佐剂; 冻干保护剂（稳定剂） 保护剂：又称稳定剂（stabilizer） ，是指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。（指对疫苗生产、血清制备等） 保护剂用途（不同用途加不同保护剂, 主要针对活的微生物或细胞） ① 菌种或毒种保存：常用甘油作保护剂 ② 细胞株保存：常用二甲基亚砜(DMSO) DMSO:二甲基亚砜，一种细胞的保护剂 ③ 疫苗冷冻真空干燥制备时：加脱脂乳（或二甲基亚 砜）和蔗糖等（不同国家有不同配方） ④ 干扰素类生物活性物质的保存：加葡聚糖 ; 保护剂（protector）的分类; ?复合物 脱脂乳、明胶、蛋白质、蛋白胨、糊精、血清、甲基纤维素等 糖类 蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖等 盐类 乳酸钙、谷氨酸钠、氯化钠、氯化钾、醋酸铵、硫代???酸钠等 醇类 山梨醇、甘油、甘露醇、肌醇、木糖醇等 酸类 柠檬酸、酒石酸、氨基酸等 聚合物 葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等 ; 疫苗冻干保护剂组成 1. 营养液： 可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分； 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状， 增加溶解度 2. 赋形剂： 防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度 3. 抗氧化剂： 抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性物质在冻干后贮存 期间的稳定性，如维生素C、维生素E和硫代硫酸钠等。 ;① 防止活性物质失去结构水及阻止结构水形成结晶而导致生 物活性物质的损伤； ② 降低细胞内外的渗透压差、防止细胞内结构水结晶，以保 持细胞的活力； ③ 保护或提供细胞复苏所需的营养物质，有利于生活力的复 苏和迅速修复自身。 ; 二、影响保护剂效能的因素 1、保护剂种类: 根据微生物种类或者用途来添加不同种 类保护剂。 ２、保护剂浓度：严格按照配方执行。 ３、保护剂配制方法：糖类不能用121℃高压灭菌处理。 ４、保护剂酸碱度（PH值）：主要对M的影响。 ;三、常用的冻干保护剂（稳定剂） 明确不同种类微生物需要添加不同保护剂 （一）细菌的保护剂 ① 需氧或兼氧厌氧菌：５％蔗糖脱脂乳或５％蔗糖、 1.5％明胶；　　　　　　　　　　　 　　 ② 厌氧性细菌：含1.5％谷氨酸钠的１％乳糖或10％脱 脂乳或7.5％葡糖血清。 注：脱脂乳：20％脱脂奶粉溶于水配制而成。 （二）病毒的保护剂 ① 5%蔗糖 脱脂乳； ② 马立克814活细胞疫苗:保存液氮.稳定剂为10%二 甲基亚砜和50%犊牛血清的199液。 注意: 微生物保护剂缓冲液的组成比例，不同厂家有 不同的配方。;1．5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂 蔗糖（或乳糖）5g，加脱脂乳至100ml，充分溶解后，110~116℃高压灭菌30~40 min。 2．明胶蔗糖保护剂 明胶 2%~3%（g/m1）、蔗糖5%（g/m1）、硫脲 1%~2%（g/m1）。先将12%~18%明胶液、30%蔗糖液和6%~12%硫脲液加热溶解，116℃高压灭菌30~40min； 3．SPGA保护剂 ;免疫佐剂;作用特点： ① 明显增强抗原性微弱的物质诱导机体产生 特异性免疫应答。 ② 用最少的抗原和最少的接种次数，产生足 够的免疫应答。;免疫佐剂作用机理 ;① 抗原递呈（antigen presentation） ② 抗原寻的（antigen targeting） ③ 免疫调节（immune modulation） ;①抗原递呈： 指抗原分子递呈给T细胞的方法。佐剂与疫苗联合使用，有助于抗原性物质在胞内被加工，被MHC分子特异性的结合、保护、运输并递呈给效应细胞。;②抗原寻的（antigen targeting） 指抗原传递给免疫系统中适当效应细胞的效率。包括吸引巨噬细胞到达组织部位、活化吞噬细胞、促进抗原与细胞受体的结合等有重要作用。;③免疫调节（immune modulation） 是指任何可以修饰的免疫效应细胞对抗原或表位进