T细胞检测技术2013选编.ppt

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T细胞检测技术2013选编

T细胞检测技术; 机体接受外来抗原及自身抗原刺激后,通过细胞免疫和体液免疫及相关系统协同作用,对抗原产生应答。; 淋巴细胞;(1)形态学检测 ;方法学评价;(2)3H-TdR掺入法(MTT法); 原理: CFSE等染料可连结到细胞内蛋白的氨基酸群(PKH26能插入脂膜),并随细胞分裂而分配到子代细胞中,每分裂一次,荧光强度减少一倍。 方法学评价 优点:操作简单;重复性强;安全; 缺点:CFSE可能干扰细胞增殖 ;二、T细胞分泌功能的检测;1、生物活性检测;2、免疫学检测;优点:简单,适用性广,应用特异的单克隆抗体,可检测单一细胞因子的含量; 缺点:无法反应细胞因子的生物活性;不同单克隆抗体检测的结果不同;敏感性稍差(100pg);(1)Realtime-PCR (2)分子杂交;三、T细胞介导的细胞毒实验;1、51Cr释放实验;2、IC Assay(In vivo cytotoxicity Assay);四、T细胞表面标志的检测;1、Tetramer技术;2、表面标志CD107a/b的检测;谢 谢

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