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1999年博士 1. 超二级结构/结构域 在蛋白质分子中，特别是球状蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元（即α—螺旋、β—折叠片和β—转角等）彼此相互作用组合在一起，，形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件单元，称超二级结构。对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或两个以上相对独立的三维实体缔合而成三级结构，这种相对独立的三维实体称结构域。 2. RNase / ribozyme有一类RNA分子本身具有自我催化功能，可完成rRNA的剪接。这种具有催化作用的RNA被称为核酶（ribozyme）。 3. 导肽/信号肽导肽：又称转运肽(transit peptide)或导向序列(targeting sequence)，它是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号。信号肽：由编码分泌蛋白的mRNA在翻译时首先合成的N端一段带有疏水氨基酸的多肽，它的主要作用是引导新生的多肽进入内质网腔，随后被信号肽酶水解。 4. Km / Tm Km是米氏常数，等于酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度。Km值是酶的特征性常数，只与酶的性质，酶所催化的底物和酶促反应条件(如温度、pH、有无抑制剂等)有关，与酶的浓度无关。酶的种类不同，Km值不同，同一种酶与不同底物作用时，Km值也不同。 Tm值是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。 5. 化学酶工程/生物酶工程化学酶工程：通过化学修饰、固定化处理、甚至通过化学合成法等手段，改善酶的性质以提高催化效率及降低成本。它包括自然酶、化学修饰酶、化学人工酶及固定化酶的研究和应用。生物酶工程：生物酶工程主要包括三个方面：1.用DNA重组技术(即基因工程技术)大量地生产酶(克隆酶)；2.对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶(突变酶)；3.设计新的酶基因，合成自然界不曾有过的、性能稳定、催化效率更高的新酶。 6. PCR / RAPD聚合酶链式反应（PCR）是利用DNA片段旁侧两个短的单链引物，在体外快速扩增特异DNA片段的技术。随机扩增多态DNA技术(RAPD)是用任意非特异性的单一引物在低温条件下与模板复性并进行PCR扩增，可对研究对象的基因组DNA作多态性分析，获得DNA指纹图谱。 7. 主动运输/被动运输 主动运输是指通过细胞膜本身的某种耗能过程,将某种物质分子由膜的低浓度一侧移向高浓度一侧的过程。被动运输：指通过简单扩散或协助扩散实现物质从浓度高处经质膜向浓度低处运输的方式。运输速率依赖于膜两侧被运送物质的浓度差及其分子大小、电荷性质等。不需要细胞代谢供应能量。 8. 盐析/透析 一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。与低分子物质比较，蛋白质分子扩散速度慢，不易透过半透膜，粘度大，在分离提纯蛋白质过程中，我们可利用蛋白质的这一性质，将混有小分子杂质的蛋白质溶液放于半透膜制成的囊内，置于流动水或适宜的缓冲液中，小分子杂质皆易从囊中透出，保留了比较纯化的囊内蛋白质，这种方法称为透析(dialysis)。 9. 第一信使/第二信使第一信使是指各种细胞外信息分子，又称细胞间信号分子即细胞因子，诸如内分泌激素，神经递质和神经肽，局部化学介导因子（神经生长因子，旁分泌激素如前列腺素、组胺与嗜伊红趋化因子等），气体信号分子（ＮＯ、ＣＯ），以及免疫细胞产生的抗体、补体与免疫细胞因子。第二信使：通常把激素称为第一信使，激素与靶位受体结合后，生成某些物质，这些物质是联系激素引起生物学效应的重要物质，称为第二信使。例如：cAMP、cGMP等。 二、 简答题（任选作2题，每题8分，共16分） 1. 今有一蛋白质混合物，各组分基本性质如下： A: M=12,000 PI=10 B: M=62,000 PI=4 C: M=28,000 PI=7 D: M=9,000 PI=5 若不考虑其它因素影响，当它们（A）流经象DEAE-纤维素这样的阴离子交换剂，用线性梯度洗脱时；（B）流经Saphadex G-50排阻层析时，这些蛋白质的洗脱顺序如何 （A）流经象DEAE-纤维素这样的阴离子交换剂，用线性梯度洗脱时洗脱顺序是，B、D、C、A，因为使用阴离子交换剂说明蛋白质带负电荷，溶液的pH大于它们的等电点，即大于10，而溶液的pH值距蛋白质等电点越远，蛋白质的电荷越多，洗脱越困难。（B）流经Saphadex G-50排阻层析时，这些蛋白质的洗脱顺序是B、C、A、D，即根据分子量从大到小的顺序洗脱。 2. 原核生物