02蛋白质化学1讲义.ppt

第 二 章蛋白质化学 Chemistry of Protein;第一节通 论;一、 蛋白质的化学概念;二、 蛋白质的生物学重要性;2. 蛋白质具有重要的生物学功能 作为生物催化剂（酶） 代谢调节作用（胰岛素） 免疫保护作用（抗体） 物质的转运和存储（血红蛋白、乳-酪蛋白） 运动与支持作用（肌动蛋白、微管蛋白接头蛋白） 参与细胞间信息传递（膜受体蛋白） 3. 氧化供能;;纤维状蛋白质和球状蛋白质;四、 蛋白质的元素组成; ;第二节 蛋白质的组成单位 ——氨基酸;一、氨基酸一般结构特征;氨基酸结构通式; ;氨基酸的构型;D/L标记法;;球棍式;二、氨基酸的分类和结构;含非极性R基团的氨基酸;（甲硫氨酸）;含极性不带电荷R基团的氨基酸;含带负电荷（酸性）R基团的氨基酸;三、蛋白质中修饰性氨基酸 ;四、非蛋白质氨基酸;五、氨基酸的一般性质;色氨酸 ：280 nm 酪氨酸： 278 nm 苯丙氨酸：259 nm;旋光性;;六、氨基酸的化学性质;;氨基酸为两性离子（兼性离子、偶极离子）;氨基酸是两性电解质;氨基酸的等点点（isoelectric point，pI）;+OH-;氨基酸等电点决定于可解离基团;氨基酸等点点的计算;甘氨酸酸碱滴定曲线;Gly等电点的计算;谷氨酸酸碱滴定曲线;Glu等电点的计算;赖氨酸酸碱滴定曲线;Lys等电点的计算;2. 氨基酸的化学反应; 茚三酮反应;Pro——黄色（440nm） 氨、胺不放CO2;亚硝酸反应;甲醛滴定;甲醛反应 ;2.4-二硝基氟苯（FDNB/DNFB）反应（Sanger）;苯异硫氰酸（PITC，Edman反应）;5-二甲氨基萘-1-磺酰氯反应;酰基化反应;成盐和成酯反应;七、氨基酸的分离和分析鉴定;氨基酸的分离鉴定;纸层析(paper chromatography);原点;双向纸层析;薄层层析（thin-layer chromatography ）;离子交换柱层析（ion-exchange column chromatography）;离子交换树脂： 人工合成的聚苯乙烯一苯二乙烯组成的具有网状结构的高分子聚合物;AA;2.97;第三节 蛋白质的结构;自然界存在的蛋白质1010-1012 组成蛋白质的氨基酸——20种 20世纪50年代初，Linder stron-Long：蛋白质具有不同结构层次; 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure);;1. 肽键和肽链;+;+;;; 一级结构的含义、特点和意义 ; 2. 几种生物活性肽;;多肽抗菌素 ; 神经肽(neuropeptide);3. 肽链的表示方式;胰岛素（Insulin）;4. 一级结构的测定;测定步骤 ;氨基酸末端分析;2．4-二硝基氟苯法（FDNB ）Sanger ;苯异硫氰酸法（PITC）/ Edman降解法 ;二甲基氨基萘磺酰氯（DNS-Cl）;肼解法;羧肽酶法 ;肽链的拆分;;肽链的部分水解;溴化氰（CNBr）裂解法;胰蛋白酶Trypsin ; 胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶（chymotrypsin）：芳香族氨基酸的羧基端 ( Phe，Tyr， Trp ，不于Pro相连) 胃蛋白酶（pepsin）：断裂键的两端均为疏水氨基酸( Leu-Val);胰蛋白酶;片段重叠法 ;二硫键的定位 ——对角线电泳 ;练习; 肽链完全水解： Met，Pro，Phe，Glu，2xLys，NH3 FDNB：DNP-Phe CNBr：2肽高丝氨酸内酯，4肽 胰蛋白酶：2 x 3肽 羧肽酶A、B均阴性