分子生物学实验课 实验二、 目的基因片断的体外扩增.pptVIP

;一、PCR 的概念 二、PCR 的基本原理 三、PCR 的基本流程 四、PCR反应体系的各成分及其对PCR的影响;变性 退火 延伸 循环次数;变性 退火 延伸 循环次数;;五、PCR反应条件的确定;五、PCR反应条件的确定;五、PCR反应条件的确定;六、常见问题与对策;无扩增产物 假阳性 非特异性扩增 拖尾;无扩增产物 假阳性 非特异性扩增 拖尾;合理分隔实验室 隔离专用操作区； 离心管、枪头等一次性使用,不要碰到别处； 除酶等不能耐高温的物质外，所有试剂、器材均高压。 各种试剂进行分装、低温贮存； 打开离心管前 应先离心，将管盖上的液体甩至管底部。 开管动作要轻，防止将靶序列溅出离心管外。 防止将靶序列吸入加样器内，造成实验室污染； 设立阴性对照管： 该管PCR反应时不加模板DNA，以监测是否存在污染。;无扩增产物 假阳性 非特异性扩增 拖尾;无扩增产物 假阳性 非特异性扩增 拖尾;小结;讲解到此结束！ 希望大家：尽可能快地掌握分子生物学基本操作方面的、一些看似微不足道、但却是将来实验成功的秘诀的一些技巧。 祝同学们实验顺畅！;The End !