β—内酰胺类抗生素高分子聚合物.ppt

β-内酰胺类抗生素高分子聚合物 ;一.高分子聚合物的研究 ;;;;;;1.??? 青霉素聚合物 青霉素的聚合反应可按两种方式进行： （1）??? 反应仅和母核结构有关，侧链中的活性基团不参与反应。 ;（1）??? 侧链参与的聚合反应 主要以氨苄青霉素为代表，反应时侧链的氨基亲核攻击β-内酰胺抗生素的羰基碳原子，形成聚合物。 ? ;1.??? 头孢菌素的聚合反应也包括两种类型： 只依赖于母核的N型聚合反应和侧链参与的L型聚合反应。对于7位侧链中不含有自由氨基的头孢菌素只能发生N型聚合反应。 ;(三)β-内酰胺类抗生素质量和过敏反应的关系 引发过敏反应的过敏原 a.??? 分子量大 b.??? 具有一定抗原决定簇 青霉素过敏反应中主要抗原决定簇——青霉噻唑基（BPO） 头孢菌素过敏反应中主要抗原决定簇——7位R1侧链 c.??? 多价 ;β-内酰胺类抗生素本身并不是过敏原，而只有当它??与蛋白、多肽、多糖等大分子载体共价结合成全抗原或本身聚合成多价半抗原后才能引发过敏反应。 ;（四）.影响聚合物形成的因素 1.??? 青霉素的聚合物 青霉素的聚合物反应速度在液体条件下和溶液的酸碱度关系密切；在固体条件下主要和样品的水分含量有关。 2.??? 头孢菌素的聚合物 固体状态下头孢菌素类产品聚合速度与含水量和贮存温度关系密切，试验表明，贮存温度较低时，含水量差异堆聚合物含量尽管有影响，但影响不大。但当贮存温度上升至37摄氏度时含水量差异对聚合物含量的影响十分显著。 3.工艺不同 如氨苄青霉素有溶媒结晶和喷雾干燥两种，一般后者的聚合物要明显多于前者。 ;（五）.口服青霉素类药物使用前进行皮试的必要性 口服青霉素，如青霉素V钾与其他注射用青霉素一样可以形成高分子聚合物，其聚合速度与药物浓度、反应温度及pH等有关。制备的青霉素V聚合物的豚鼠皮肤被动过敏试验（PCA）阳性，口服青霉素V高聚物后，30分钟血清中可检出高聚物；在30分钟到1小时可引发豚鼠PCA反应阳性，从而证明青霉素中高分子聚合物可经胃肠道吸收而引发过敏反应。 ;二.高分子杂质分析方法 （一）概述： 国内外已有许多分离、分析β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的报道。色谱法是主要分离分析的方法。其分离模式有三类：（1）反相模式（2）离子交换模式（3）凝胶色谱模式 由于结构不同的高分子杂质通常有相似的生物学特性，因此，在药品质量控制中一般不需分别控制不同结构的高分子杂质含量，而只需控制商品中高分子杂质的总量。故根据分子量差异进行分离的凝胶色谱模式是简便易行的分离模式。 ;（一）凝胶色谱分析法的原理： 1.??? 分离原理 利用凝胶色谱的分子筛机制，让药物分子自由进入凝胶颗粒内部，而高分子杂质被排阻不能进入，在色谱过程中不被保留，最早被流动相洗脱。 2.??? 凝胶介质 根据β-内酰胺类抗生素和其高分子杂质分子量的特点，比较数种凝胶介质，最后选用Sephadex G-10作为凝胶介质（排阻分子量在1000道尔顿左右）。 ;（一）分析方法 1.??? 系统适用性试验 为保证不同实验室间测定的精密度符合规定，要求方法系统适应性参数： 理论板数及拖尾因子： 用蓝色葡聚糖2000的溶液（1mg/ml）作为参比溶液，测定在流动相A、B中的Kav＝0的保留时间，并计算出理论板数及拖尾因子。 在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间比值应在0.93～1.07之间，对照溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间比值应为0.93～1.07。 药物分子和凝胶介质间的相互作用和药物的结构有关。其色谱分析受色谱条件如：流动相的组成、浓度、pH、流速等因素的影响。所以可通过改变色谱调节调节药物分子和凝胶介质间的相互作用，使高分子杂质和药物分子间的分离良好，通过对流动相与洗脱速度的优化，已成功建立数十种β-内酰胺类抗生素高分子杂质的分析方法。 ;2.??? 自身对照的外标法 由于β-内酰胺抗生素的高分子杂质具有高度的不均一性和不确定性，高聚物本身不稳定，不易制备。用高聚物本身作为对照的外标法定量有一定难度。同时由于高分子杂质含量较低，进样量一般相对较大，是药物本身色谱峰十分宽大，导致主峰的峰面积积分误差较大，因此也限制了面积归一化法的应用。 试验证明，在特定条件下，β-内酰胺抗生素可缔合形成表观分子量较大的缔和物，缔和物在Sephadex G-10凝胶色谱系统种色谱行为与高分子杂质一样，都在Kav＝0处表现为单一色谱峰，利用这一特点，在Sephadex G-10凝胶色谱系统种制定了新的定量方法——自身对照外标法。 ;三．2005年版β-内酰胺类抗生素高分子聚合物法增修订概况 ;（一）.修订内容 1.??? 对原收载的8个品种的色谱条件与系统适用性试验均与新增品种项下