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2014高考生物第一轮复习课件x3—1
;第1讲 基因工程——及其安全性(含生
物武器);(1)基因工程的诞生(Ⅰ) (2)基因工程的原理及技术(Ⅱ) (3)基因工程的应用(Ⅱ) (4)蛋白质工程(Ⅰ) (5)转基因生物的安全性(Ⅰ) (6)生物武器对人类的威胁(Ⅰ);一、基因工程的概念及基本工具
1.概念
(1)操作环境:体外
(2)操作水平:分子(DNA)水平,又叫______________
(3)原理:________
(4)优点:定向改造生物性状;2.基因工程的基本工具; (2)DNA连接酶;(3)载体;二、基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取
(1)目的基因:编码蛋白质的基因。
(2)获取方法:从基因文库中获取、利用_________扩增目的基因、利用___________人工合成。
2.基因表达载体的构建——基因工程的核心
(1)目的:使目的基因在受体细胞中____________,并可以遗传给下一代;使目的基因能够_______和发挥作用。;(2)基因表达载体的组成:目的基因、________、终止子和标记基因等,如图。; ①与载体相比较,增加启动子、目的基因和终止子三个基因片段,其功能各不相同。
②启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。;3.将目的基因导入受体细胞
导入植物细胞:________________、基因枪法、花粉管通道法
导入动物细胞:____________
导入微生物的方法:先用________处理再融合;4.目的基因的检测和鉴定
(1)检测:分子水平。
检测是否有目的基因:分子杂交技术
(________+转基因生物________)
检测是否转录:分子杂交技术
(DNA探针+转基因生物________)
检测是否翻译:________________
(2)鉴定:个体水平。;三、基因工程的应用;四、蛋白质工程
1.崛起缘由
天然蛋白质________________人类生产和生活的需要。
2.目标
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对____________进行分子设计。
3.操作手段
基因修饰或基因合成。
4.设计流程
预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有的________序列→找到对应的____________序列(基因)。 ;1.基因工程的基本原理和理论基础概括(如下图);2.与DNA分子相关的酶
(1)几种酶的比较;(2)限制酶与DNA连接酶的关系
①限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
②DNA连接酶起作用时不需要模板。;3.载体
(1)作用
①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。
②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
(2)具备的条件
①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。
②有多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接。
③具有特殊的标记基因,以便进行筛选。
(3)种类
①质粒:一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。
②λ噬菌体的衍生物。
③动植物病毒。; (1)一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造。(2)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因的检测。;★ 本部分知识多以选择题的形式出现,并且与必修内容联系密切,也可在基因工程综合题中作为某一具体问题出现。;
(2012·江苏单科,32)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C CGG、G GATCC、GATC、CCC GGG。请回答下列
问题。;(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是______________末端,其产物长度为______________。;(3)若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有________种不同长度的DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测,部分含
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