三种常见人呼吸道腺病毒六邻体蛋白的克隆、表达及抗原性分析.pdfVIP

中华微生物学和免疫学杂志 ２０１４ 年 ５ 月第 ３４ 卷第 ５ 期　 ， ２０１４， ．３４， ．５ ·３９３· Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍａｙ Ｖｏｌ Ｎｏ · 病毒学 · 三 种 常 见 人 呼 吸 道 腺 病 毒 六 邻 体 蛋 白 的 克 隆 、表 达 及 抗 原 性 分 析 田新贵　周荣　薛春燕　李潇　周志超 【 摘要 】　目的　克隆、表达常见的人呼吸道腺病毒的主要中和抗原六邻体蛋白，分析重组表达 产物的抗原性和免疫原性。 方法　分别 扩增克隆人 ３ 型、４ 型、７ 型腺病毒完整的六邻体蛋白基 ＰＣＲ 因，测序和序列比对并与 上人腺病毒的六邻体蛋白进行同源性比对；对其主要的抗原区进 ＧｅｎＢａｎｋ 行克隆、表达和纯化，表达产物免疫动物， 和 实验对表达产物的抗原性和免疫原性 ＥＬＩＳＡ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 及其交叉反应进行分析。 结果　国内首次报道 １ 株人 ４ 型腺病毒的六邻体基因序列，与 中 ＧｅｎＢａｎｋ 的 ３ 分离株核酸及氨基酸的同源性均大于 ９９％；３ 种腺病毒包含全部高变区的六邻体部分区段 ＮＨＲＣ 在大肠杆菌中成功表达并纯化，重组蛋白可以被不同型别的人腺病毒免疫血清识别，重组蛋白免疫小 鼠血清可以识别不同型别的人腺病毒，而型间反应有显著差异，预测了 ３ 种腺病毒六邻体型、型间特 异性表位。 结论　成功表达人 ３ 型、４ 型、７ 型腺病毒六邻体蛋白主要抗原区，重组表达产物有强免疫 原性，包含型间、型特异性抗原表位。 【 关键词 】　人呼吸道???病毒； 六邻体蛋白； 重组表达； 免疫原性； 表位 Cloning and expression of hexon protein of human respiratory adenovirus of three serotypes and analysis of antigenicity of the recombinant proteins　Tian Xingui， Zhou Rong， Xue Chunyan， Li Xiao， Zhou Zhichao．The First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University， State Key Laboratory of Respir- atory Disease， Guangzhou Institute of Respiratory Disease， Guangzhou 510120， China Corresponding author： Zhou Rong， Email： zhou3218＠yahoo．com 【 Abstract 】　Objective　 - Ｔｏ ｃｌｏｎｅ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓ ｔｈｅ ｈｅｘｏ