临床常见念珠菌的PCR-RFLP鉴定方法研究.pdfVIP

中华临床医师杂志（电子版）２０１１ 年 １ 月第 ５ 卷第 １ 期　 （ ）， １，２０１１， ．５， ．１ ·１５２· Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｊａｎｕａｒｙ Ｖｏｌ Ｎｏ · 短篇论著· 临床常见念珠菌的 唱 鉴定方法研究 ＰＣＲ ＲＦＬＰ 窦娟　张全斌　金柳　张景萍　王萍　商润萍　郑新萍　周永安 　　【摘要】　目的　建立临床常见念珠菌的聚合酶链反应唱限制性片段长度多态性（ 唱 ）检测技术。 方法　用真菌通 ＰＣＲ ＲＦＬＰ ???引物 １唱 ４ 分别扩增白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌 ５ 种菌株的 １唱５．８ 唱 ＩＴＳ ＩＴＳ ＩＴＳ Ｓ ｒＤＮＡ ２ 区域，然后对扩增产物进行 Ⅰ酶切分析。 结果　５种念珠菌标准菌株经 唱 分析后产生了 ５ 种不同的特异性 ＩＴＳ Ｍｓｐ ＰＣＲ ＲＦＬＰ 条带，成功地将临床上常见的 ５ 种念珠菌区分开来。 应用此方法鉴定了 ６０ 株临床分离的念珠菌，其 唱 结果与标准菌 ＰＣＲ ＲＦＬＰ 株一致，测序结果进一步证实了此方法的可靠性。 结论　 唱 检测技术具有快速、稳定、特异、准确性高的特点，在常见 ＰＣＲ ＲＦＬＰ 致病念珠菌鉴定方面具有良好的临床应用前景。 【关键词】　念珠菌属；　聚合酶链反应 　　近年来，随着器官移植、癌症患者、 感染患者的增多和免疫抑制剂、广谱抗真菌药物的广泛使用，临床真菌感染的发 ＨＩＶ 生率和死亡率明显上升。 念珠菌感染在真菌感染中占首位，而白色念珠菌（ ）是念珠菌感染中最主要的病原 ［１］ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ 菌 ，但近年来的流行病调查结果显示，念珠菌感染的类型发生了变迁，白色念珠菌的检出率逐渐下降，非白色念珠菌，比如 热带念珠菌（ ）、光滑念珠菌（ ）、克柔念珠菌（ ）、近平滑念珠菌（ 唱 Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ［２唱３］ Ｃａｎｄｉｄａ ｇｌａｂｒａｔ