波谱-研究生-13C化学位移讲解.ppt

;第三节 13C化学位移;3.常用氘代溶剂的13C的?数据; ;;;二．量子理论;去偶与偶合谱;;§２.2　质子宽带去偶 （Proton broad band decoupling） ;　　一般来说：分子中有多少个不同化学环境的碳，则在图谱上显示出多少条谱线。 　?　在质子宽带中去偶中，H2的功率很大，若将H2的功率变小，则图谱将出现一个有趣的现象。伯碳和叔碳峰变成一宽的馒头状峰。仲碳和季碳仍为单峰。 　　　 ? 用来区别别仲碳与季碳 这种技术称为：弱噪声去偶（Proton week noise decoupling）;弱噪声去偶技术的应用举例;§2.3 在13C{1H}实验中的核的Qverhauser 效应;;?　 NOE是通过分子内偶级一偶极驰豫机制引起的。具有自旋的任一核是一个磁偶极矩（磁矩）。假设分子中有二个这样的核A和X构成AX为例（13C和１Ｈ）; 空间位置靠近(0.5 nm)的两个原子核，当其中一个核的自旋被干扰达到饱和时，另一个核的谱线强度也发生变化，这就是核Overhauser效应(Nuclear Overhauser Enhancement, NOE)。 NOE的强度与核间距的六次方成反比 由于NOE的强弱直接与两个核之间的距离有关，因此它是立体化学和蛋白质的溶液结构测定中最重要的约束条件;　常规C-13谱上信号强度与碳的数目： 不完全呈定量关系，因为信号强度主要取决于各个碳的纵向驰豫时间T1。 T1值越小，信号越强。 各种碳核的T1的顺序如下： 可大体根据峰高对同类型碳核的碳数的比例作出 粗略的估计。 羰基碳、双键季碳的T1值很大，故吸收峰很弱，有时甚至弱到无法观测的程度。 ;NOE;§2.４质子偏共振去偏 （Proton off-resonance decoupling）;;§2.5 选择质子去偶（Selective proton decoupling） ;;一、门控去偶（gated decoupling） 质子宽带去偶：无C-H 偶合信息。 质子偏共振：仅看到一键剩余偶合，无远程偶合信息 非去偶谱：有此上信息，但时间长。 采用门控去偶技术：带有N0E的不去偶技术，也称交替脉 　　　　　　　　　冲13C{1H}双共振。 即：在接收信号期间，去偶场H2不照射，由于NOE只通过自旋—晶格驰豫起作用的，而且自旋－晶格驰豫时间一般较长，所以当去偶场H2不照射时，去偶立即停止，但NOE仍然存在，这样得到的碳谱为带有NOE的不去偶谱．;? 既有一健偶合，也有远程偶合，还有NOE效应．; 二、反门控去偶（inverse gated decompling） 在质子宽带去偶谱中，由于NOE和各类碳T1的不同，各个峰的积分和碳的项目不成比例。 　　? 为此采用了没有NOE的门控去偶, （gated decoupling without NOE）技术，叫做反门控去偶。 　　原理：去偶场H2在接收信号期间照射，而在间歇期间将H2去掉。间歇时间必须大大超过各个碳中最长的T1。以便让所有的碳核完成自旋——晶格驰豫。 　　 　　?特征：用于定量 ; ;§2.７　化学位移试剂与驰豫试剂; 位移试剂加进试样后，由于稀土元素离子的未偶电子与试样中的极性基因，如-OH，-ＮH2，-SH，-COOH，C=0等作用，使样品中核产生诱导的，附加的化子位移，所以加入位移试剂，可把谱扩展拉开．诱导化学位移值，随位移试剂的浓度增加而增大。;§2.８　标记技术;§2.９　一些极化转移技术与实验技术;（一）APT（Attached proton test），与碳结合质子的测定 1980年提出，1981年专利实验结果。 a.用此方法可以改变不同类型碳原子的信号强度和方向，因而有效地区分CH3，CH2,CH和季碳，取代偏共振。 b.以方向不同的单峰的取代偏共振的多重峰，使灵敏度明显提高。且不改??共振峰的化学位移和峰形。; ;;?　 不足之处：偶合谱的相对强度和相位与正常的FT谱有所不同，有时还会产生畸变。;，仍会残留部分CH2 与CH3信号，故导致图谱不够清　;? 随着脉冲序列的?角不同，其中的CH，CH2，CH3的去偶DEPT信号的增强见于下表。 使用DEPT程序时，-CHn基因中13C信号的增强;依据此表：可以通过调节　　　　　， 　　　　　，;②当;练习1：