利用三种不同抑菌方法研究中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响.pdfVIP

2014·13 奶牛 DAIRY HEALTH 保健 利用三种不同抑菌方法研究中药地榆对奶牛 乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响 刘佳龙，魏晓媛，杜西翠，史万玉，钟秀会 (河北农业大学动物医学院，保定　071001) 中图分类号：S858.23 文献标识码：A? 文章编号：1004-4264（2014）13-0033-03 摘? 要：本试验以地榆水煎液为试验药物，以标准金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌为试验菌株，采 用琼脂平板扩散法(打孔法)、液体培养基连续稀释法(试管法)和固体培养基连续稀释法，观察中药地榆对奶牛 乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响。结果表明，药物固体培养基连续稀释法比其他两种方法敏感性高，重复 性好，能直接定量测出抗菌药物对奶牛乳房炎常见病原菌的最低 MIC值，更适于中药体外抑菌作用的研究。 关键词：奶牛乳房炎；地榆；最小抑菌浓度 乳房炎是奶牛常见病之一，泌乳牛发病率为 增菌培养，取对数生长期的菌液，使用时用麦氏计数法 20％~60％，一般由多种致病菌混合感染所致，对奶 将菌液浓度调整为1×104个/mL。无乳链球菌用加绵羊 业生产危害严重[1]。虽然众多科研人员进行了多年不懈 血营养琼脂固体培养基37℃增菌培养。 地研究，但是奶牛乳房炎的防治问题一直未能得到很好 1.1.2? 药物 的解决。近年来，由于抗生素的不合理应用，临床耐药 地榆饮片购于河北省保定市益民药店。地榆水煎液 菌株不断增加，细菌及真菌的耐药性不断增强，致使 的制备：取地榆100g，加水1 000mL，浸泡2h，煎煮 临床奶牛乳房炎的感染率不断增高[2]。中药中存在多 2次，每次30min，合并滤液，浓缩至1g/mL的药液， 种活性强、毒性低的有效成分，因此从天然产物中寻 5 000r/min离心10min，取上清液过滤，8 lb、20min高 找抗菌资源、筛选抗菌药物越来越受到国内外学者的 压蒸汽灭菌，临用前用无菌蒸馏水倍比稀释成以下8个 重视，而通过体外抑菌试验筛选具有抗菌活性的中药 浓度：0.25、0.125、0.062、0.031、0.016、0.008、 有效成分已引起人们的关注[3]。本试验采用三种不同 0.004、0.002g/mL。 抑菌方法研究中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌 1.1.3? 培养基 效果的影响，为奶牛乳房炎的治疗提供参考。 LB液体培养基的制备：按培养基配方比例(酵母提 取物5g、蛋白胨10g、NaCl5g、水1 000mL)常规配制 1? 材料与方法 培养基1 000mL，调pH值至7.4～7.6，在石棉网上加热 1.1? 材料 使其溶解后，121℃、20min高压蒸汽灭菌，备用。 1.1.1? 菌种 LB药物液体培养基的制备：取9支50mL试管，在 标准金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌由河