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PAGE  PAGE 18 第一章 绪论 分子生物学的概念 (广义):在分子水平上研究生命现象。 (狭义):在核酸与蛋白质水平上研究基因的复制、表达、调控以及基因的突变与交换的分子机制。 DNA双螺旋结构、PCR是由谁发现的? 沃森和克里克。 1983年Kary B. Mullis建立了在仅有极少量模板DNA的前提下实现目标DNA片段以几何级数扩增的“聚合酶链式反应,PCR”。 分子生物学在哪些方面具有广泛的应用? 从豆丁上找的: 1基因工程生产药物:重组蛋白质的生产:生产昂贵的药物蛋白。可以将生物合成相应药物组分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物。 2 基因诊断 3基因治疗 4基因改造物种及其转基因生物食品 5用于环境保护:基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏的检测环境中的病毒细菌等污染。 第二章 基因概念的演变与发展 经典基因的概念 经典的基因概念:基因是彼此孤立地、呈线性排列在染色体上的遗传实体。 顺反子 顺反子(基因):是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小的遗传单位。染色体上一个区段,在一个顺反子内有若干个交换单位,最小的交换单位是交换子,最小的突变单位是突变子。 DNA双螺旋模型 1. 脱氧核苷酸之间通过3’,5’磷酸二酯键连接,形成螺旋体的磷酸骨架; 2. 两条链的碱基以氢键连接,并遵循A-T,C-G配对原则; 3. 双螺旋中任意条核酸链绕纵轴旋转一周所升降的螺距为3.4nm,其中包含10个碱基对,每对碱基对之间相距0.34nm。 4. 双螺旋形成一个大沟和一个小沟,其中大沟往往是基因表达调控的重要位点。 为什么RNA不如DNA稳定?在紫外线下的吸光值更大? 正是由于DNA的核糖 2’位没有自由羟基的缘故,使得DNA非常稳定。而RNA的核糖 2’位有自由羟基,故易水解,不稳定。 由于RNA是单链,碱基暴露在外,因此比DNA具有更强的紫外吸收值。 什么是DNA的变性与复性,这一特性有什么应用? 变性:DNA双螺旋碱基间的氢键断裂,两条核苷酸链彼此分离,这一过程称为变性(denaturation)。 复性:已变性的DNA,在一定条件下两条核苷酸链的配对碱基之间又重新形成氢键,恢复到天然的双螺旋结构,这一过程称为复性(renaturation) DNA双螺旋的呼吸作用? 双链DNA中配对碱基的氢键不断处于断裂和再生状态之中,特别是稳定性较低的富含A-T的区段,氢键的断裂和再生更为明显。在微观上,它们常常发生瞬间的单链泡状结构。这种现象称为双螺旋的呼吸作用。 超螺旋有什么重要的生物学意义? 1. 超螺旋可使DNA分子形成高度致密的状态从而得以容纳于有限的空间。 2. 超螺旋形式是DNA分子复制和转录的需要:超螺旋多余的能量可能使DNA双股链分开,或局部熔解。这种结构上的变化对DNA分子复制和转录等的启动很重要。天然的DNA都呈负超螺旋,负超螺旋会部分地转变为单链泡状结构,蛋白质会与这些单链泡状结构结合,参与复制和转录 DNA如何装配称染色体? 核小体 组蛋白 DNA 染色质丝 染色体 常染色体 端粒 异染色体 着丝点 H1 H2A H2B H3 H4 什么叫基因重叠?有什么生物学意义? 不同基因共用同一段DNA序列, 1. 符合原核生物生物进化的经济原则: a. 较少的基因组含量(C值小)编码大量的基因; b. 同一调控序列调控不同基因的表达。 1 2 3 4 5 6 Genomic DNA 成熟的mRNA(1) 成熟的mRNA(2) 启动子 2. 丰富和发展了基因的概念,部分解释了 “C值 ≠c值” 的矛盾 。 卫星DNA?(考了名词解释) 卫星DNA: 一些高度重复序列,通常A/T含量高。由于A/T段浮力密度小,因此将DNA切成数百个碱基的区段进行CsCl密度梯度离心时,常在主要的DNA带的上面有一个次要的DNA带相伴随,这就是卫星DNA。(长度为2-6bp的高度重复序列又成为微卫星序列)。 什么叫间隔基因?间隔序列的进化意义? 间隔基因:由若干外显子和内含子序列相间隔排列组成的基因。 进化意义: 1、增加变异概率,有利于进化 a. 内含子不受选择压力,有利于累积突变,增加总变异量 b. 内含子较长,易于进行基因间重组,增加外显子重新组合的概率 2、有利于物种的稳定性 外显子变异,蛋白质序列、结构变异,受到选择压力,易被淘汰;内含子变异,不影响蛋白质功能,不影响物种遗传稳定性,不被清除而易被保留下来。 3、扩大遗传信息储量:外显子与内含子区分的相对性(mRNA的选择性剪接) 4、利用内含子进行基因表达调节(有些内含子编码小RNA)。 假基因? 假基因——具有与功能基因相似的序列,但不能翻译有功能蛋白质的无功能基因。 什么叫C值?进化C值矛盾?你认为可能的原因是什么?(基因

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