生物分离技术讲解.pptx

生 物 分 离 技 术;主 要 内 容;;定义：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。也称生物工程下游技术。 ;生物分离技术的特点;生物分离的基本原理;生 物 分 离 的 基 本 过 程;;常见的生物分离技术;过滤是在推动力的作用下，位于一侧的悬浮液（或含尘气）中的流体通过多孔介质的孔道向另一侧流动。颗粒则被截留，从而实现流体与颗粒的分离操作过程。 ;离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。;利用化合物在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中;结晶：指从饱和溶液中凝结，或从气体凝华出具有一定的几何形状的固体（晶体）的过程。 蒸发结晶：蒸发溶剂，使溶液由不饱和变为饱和，继续蒸发，过剩的溶质就会呈晶体析出。 降温结晶：先加热溶液，蒸发溶剂成饱和溶液，此时降低热饱和溶液的温度，溶解度随温度变化较大的溶质就会呈晶体析出。 色谱分离：是基于不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，在采用流动相洗脱过程中呈现不同保留时间，从而实现分离。 沉析：利用沉析剂使所需要提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。 ;膜分离 ：膜分离技术是利用一张特殊制造的，有选择透过性的薄膜，在外力推动下对混合物进行分离、提纯、浓缩的一种新型分离技术，是根据混合物的物理性质的不同用过筛的方法将其分离，或根据混合物的不同化学性质分离开物质。 电泳（electrophoresis，EP）：指带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。 离子交换：是用一种称为离子交换树脂的物质来进行的。离子交换树脂遇水溶液时，能够从水溶液中吸着某种(类)离子，而把本身所具有的另外一种相同电荷符号的离子等摩尔量地交换到溶液中去，这种现象称为离子交换。;;重组???胰岛素产品生产（分离）工艺流程;菌种扩培 对从菌种库中取出的菌种进行活化及初步扩大培养 基因工程大肠杆菌、基因工程酵母菌 种子罐培养 在种子罐中对菌种进行进一步的扩大培养，至菌种到对数生长期 时转入发酵罐培养 发酵罐培养 分两阶段进行控制，第一阶段主要通过控制溶氧和补加甘油使菌 体达到富集的目的，第二阶段通过补加甲醇使菌体进行高密度表 达目的产物，HPLC检测目的产物含量 ;发酵液固液分离 目的产物存在于发酵液上清中，此步骤主要控制目的产物收率 P1纯化 通过两步柱层析，分别去除发酵上清液中的色素和杂蛋白，利用紫外检测仪控制目的产物收率，主要试剂为乙醇与异丙醇 P1沉淀、干燥 调节PH值，使P1沉淀，再经离心干燥，得中间体I固体 P2纯化 控温进行转肽反应，主要试剂为DMSO与1,4-丁二醇，再通过柱层析进行提纯，主要试剂为异丙醇 P2沉淀、干燥 调节PH值，使P2沉淀，再经离心干燥，得中间体II固体 ;;谢谢大家！