生物药物与检验酶法讲解.ppt

酶 分 析 法;教学目的和要求 熟悉： ;概 述1.酶的概念是生物体内;酶是由活细胞产生的具有催化作用;酶是特殊的催化剂 (1) 生物;概 述3.酶分析法包括两种类型;4.两类酶分析法的区别相同：从;酶法分析的优点1 用于复杂组分;共同点：原理和方法相同，以酶的;第一节 酶活力测定法 ;一、基本概念1.酶活力：指酶催;酶活力(enzyme acti;酶催化的反应速率可用单位时间内;引起酶促反应速率降低的原因(1;检验酶反应和测定系统是否适宜的;一、基本概念4.酶反应的速度：;一、基本概念6.常用的酶分析法;一、基本概念7.酶的活性单位（;国际酶活力单位1961年,国际;酶的比活力(specific ;活力单位(U)与比活力U＝速度;酶促反应速度的测定方法产物浓度;酶活力测定实例首先 确定反应条;二、酶促反应的条件基本要求：反;确定反应条件时应考虑： （1）;（2）pH值 注意选择适;pH对酶反应的影响;pH影响酶活力的原因 (1) ;二、酶促反应的条件 （3）温度;最适温度 机理：温度导致酶;温度对酶反应的影响在最适温度之;（5）空白和对照 空白;三、酶活力的测定方法按取样及检;（一）取样测定法1.取样测定法;取样测定法 在酶反应开始后;取样测定法取样测定法一直沿袭至;3、终止酶反应：添加酶的变性剂;4、特点：不需要特殊仪器容易找;（二）连续测定法1.连续测定法;连续测定法基于底物和产物在物理;酶活不能反映酶的使用效果 ;测定过程中应注意的问题产物的测;酶反应进程曲生化药物制剂检验程序酶浓度曲线;酶分析法的检测方法;最常用的方法介绍如下：(1) ;一、紫外-可见分光光度法 NA;还原氧化NAD+NADH在33;丙酮酸+NADH+H+LDH乳;酶偶联测定法：是应用过量、高度;被测反应肌激酶辅助反应丙酮酸激;二、荧光分析法三 华勃氏呼吸仪;华勃氏微量呼吸仪（瓦氏呼吸仪）;五 电化学法（electroc;第二节 酶法分析 一、终点;一、原理是在以待测物质为底物的;用于复杂组分中结构或物理化学性;一、终点测定法1.原理：先借助;（一）终点法条件 1．酶的底;反应的平衡谷氨酸+NAD++H;3．反应液中的酶量 ：要使酶反;反应产物抑制S+ATPP+AD;（二）终点法种类1．单酶反应定;（二）终点法种类（2）产物增加;1. 羟基丙酮酸的定量测定羟;2．和指示酶反应偶联的定量法（;2、和指示酶反应偶联的定量法①;D-2-磷酸甘油酸磷酸烯醇丙酮;②以脱氢酶以外的酶为指示剂D-;二、反应速度法反应速度法是在一;特 点 ：①测定速度快②试;具体测定方法（一）利用作底物的;（一）利用作底物的测定法 在一;甘油三酯甘油+脂肪酸甘油+AT;（二）利用辅酶或抑制剂作用的测;D-2，3-二磷酸甘油酸的定量;（三）特殊的反应速度测定法 如;乙酰磷酸+CoA-SH乙酰Co;作 业1、什么是酶法分析？与