6实验六+平板菌落分离法放线菌的插片培养和菌种保藏简介.doc

实验六 平板菌落分离法、放线菌的插片培养和菌种保藏简介 内容：1、细黄链霉菌的平板划线分离；2、细黄链霉菌的插片培养；3、菌种保藏技术简介；4、台式发酵罐简介；5、支管三角瓶的包扎和灭菌；6、分装液体培养基，2组1瓶，100ml/瓶；7下周实验12点30分开始，切记！ 细黄链霉菌的平板划线分离和插片培养 细黄链霉菌斜面菌种 彻底融化高氏1号培养基，冷却至50—55℃ 无菌操作倒平板（每皿15ml，每人倒4块正常厚度平板＋一块略厚平板，用来插片） 冷凝彻底 分区（ABCD） 平板划线 无菌操作取菌，先划A区； 环灼烧后划B区－C区－D区，杀残菌。（插片A区要大，斜插无菌盖片） 皿盖上标明组号，姓名和日期 28℃倒置培养7天 观察结果 无杂菌污染；没划破平板；A区菌苔，B到D区，菌落逐渐稀疏， D区出现大量的单菌落；D区和A区平行；线条致密，流畅。 菌种保藏 低???，缺乏水（干燥），缺乏氧气和缺乏养料。 传代保种法：斜面或者寄主体内传代； 低温法：4℃，斜面法；半固体穿刺法；隔绝空气（如加石蜡油）更好； -20—80℃，菌悬液加防冻剂（甘油法或者DMSO）； 液氮，菌悬液＋防冻剂； 常温下干燥：如砂土管法，明胶片法；保存也往往放在4℃； 低温下干燥，冷冻真空干燥法；保存于4℃。