脓汁和粪便标本中病原菌的检测—4.ppt

斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支， 镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张。;染色瓶6组，染色架8个。;医学微生物学实验综合性实验一;斜面培养物的观察;细菌染色法;结核分枝杆菌 抗酸染色;革兰染色法 Gram Staining 革兰染色法是丹麦内科医生 Christain Gram于1884年创立的一种细菌染色方法，已有120多年的历史，仍在广泛使用，是细菌学中最为经典的染色法。;革兰染色法原理的三种学说;革兰染色的意义 鉴别细菌：把细菌分成G+和G-两大类。 选择抗菌药物：G+球菌对青霉素敏感,G-杆菌耐药。 了解细菌的致病机理：G+菌大多产生外毒素,G-菌产生内毒素。 革兰染色的步骤 涂片 → 干燥 → 固定→ 染色;接种环取生理盐 水3～4ul，2滴。;涂片;革兰染色方法步骤;革兰阳性菌 革兰阴性菌;G+链球菌;液体培养基接种 Broth Transfer — 悬浮法 Suspending Method;生物安全警告;显微镜油镜的使用P13;100倍浸油物镜使用方法;温馨提示;革兰染色法P15 甲→黄色，紫黑 乙→黄色，紫黑 丙→白色，粉红 丁→白色，粉红 肉汤接种法P10 甲→黄色 乙→白色 丙→紫黑 丁→粉红 油镜的使用P13 10×物镜→看到标本→滴加香柏油→100×油镜→浸泡油中→模糊物象→细调节调焦，观察物像→记录结果→关闭电源→ 擦镜纸拭去香柏油 →擦镜纸沾少许乙醇和乙醚（7:3）混合液擦拭→擦镜纸擦拭油镜。 聚光镜孔径光阑环上的物镜倍率（10×或100×）必须转到正面。;思考题;;实验小结 用普通平板，从浓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落，这两株细菌，显微镜油镜下均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。结合菌落色素，这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。;葡萄球菌三个种的鉴别; 用伊红美蓝平板,从粪便标本分离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。紫黑色菌落可能是能分解乳糖的非致病菌大肠埃希菌。粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。显微镜下，均为G-杆菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。;常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材：靠近插座一侧第1列放置接种针,第2列放置 接种环，另一侧中间两行放置油性笔和打火机。;实验器材 整齐有序;革兰染色瓶