S的发酵工艺研究论文.doc

2011-2012年第一学期发酵工程学期论文 课题 S-腺苷甲硫氨酸的发酵工艺研究 班级: 10生物1班 组员： 郑颉怡 曾桂芳 温建超 许梓豪 刘俊威   SUBJECT \* MERGEFORMAT S-腺苷甲硫氨酸的发酵工艺研究  PAGE 8 摘要：酿酒酵母LS101发酵生产S-腺苷甲硫氨酸（SAM）实验室阶段的工艺控制温度、pH、转速、时间对S-腺苷甲硫氨酸发酵的影响。方法：利用酿酒酵母菌株产S-腺苷甲硫氨酸进行种子培养以及种子扩大培养，通过控制变量法得知温度、pH、转速、时间对S-腺苷甲硫氨酸发酵的影响。结果：酿酒酵母LS101发酵产S-腺苷甲硫氨酸的最适温度为25℃左右，最适pH为5.0，最适转速为250r/min及培养的最适时间为96h。结论：得出最适于S-腺苷甲硫氨酸的生产因素条件，更好的提高S-腺苷甲硫氨酸的产量。 关键词：酿酒酵母LS101、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、发酵工艺  目录 一、摘要,研究前景,关键词 1  TOC \o 1-3 \h \z \u  HYPERLINK \l _Toc311754676 二、材料及仪器  PAGEREF _Toc311754676 \h 3  HYPERLINK \l _Toc311754677 （一）、材料  PAGEREF _Toc311754677 \h 3  HYPERLINK \l _Toc311754678 （二）、仪器  PAGEREF _Toc311754678 \h 3  HYPERLINK \l _Toc311754679 三、工艺流程  PAGEREF _Toc311754679 \h 4  HYPERLINK \l _Toc311754680 第一步 菌株筛选  PAGEREF _Toc311754680 \h 4  HYPERLINK \l _Toc311754681 第二步 种子培养与发酵  PAGEREF _Toc311754681 \h 4  HYPERLINK \l _Toc311754682 第三步 种子扩大培养  PAGEREF _Toc311754682 \h 4  HYPERLINK \l _Toc311754683 第四步 保藏  PAGEREF _Toc311754683 \h 4  HYPERLINK \l _Toc311754684 四、影响发酵的因素  PAGEREF _Toc311754684 \h 5  HYPERLINK \l _Toc311754685 五、总结  PAGEREF _Toc311754685 \h 6   二、材料及仪器 （一）、材料 S-腺苷甲硫氨酸高产菌株酿酒酵母LS101、蔗糖、酵母粉、磷酸二氢钾、K2HPO4?H2O、MgSO4?7H2O、ZnSO4?7H2O、MnSO4?4-6H2O、8L发酵罐间歇分批补料发酵、甘油、琼脂、尿素、L-甲硫氨酸,氯化钙、少量的磷酸盐和其他无机盐、氢氧化钠 （二）、仪器 UV-2100型紫外分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）； Agilent 1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司）； TGL-20B-C高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）； GBJT-7W型全自动发酵系统（镇江东方生物工程设备技术公司）。  三、工艺流程 发酵工程的工艺流程一般是菌株筛选→种子培养与发酵→种子扩大培养→经过分离纯化后得到产品，而我们所研究的S-腺苷甲硫氨酸目前还停留在实验室发酵的阶段，还没有正式投入到市场大量生产，所以最后一步我们改为了保藏。各个步骤的详细内容如下： 第一步 菌株筛选 酿酒酵母菌株产S-腺苷甲硫氨酸，,通过在实验室检测,最佳发酵条件为：25℃，发酵液初始pH值：5．0，摇床转速：225r／rnin，发酵时间：108h,在该发酵条件下，酿酒酵母菌株A18A，产S-腺苷甲硫氨酸最高量达：2．54g／L 菌株筛选很重要，因为好的酵母菌株能高产率的S-腺苷甲硫氨酸，为后面的试验奠定基础。 第二步 种子培养与发酵 S-腺苷甲硫氨酸种子培养基（/L）的成分是是蔗糖50 g，酵母粉 10 克，磷酸二氢钾 4 g，K2HPO4?3H2O 2.6克，MgSO4?7H2O 0.1克，ZnSO4?7H2O 2.5 mg，MnSO4?4-6H2O 12.5 mg； 以上是S-腺苷甲硫氨酸培养基的成分，按照比例配置完毕后还有注意调整pH值和灭菌。跳蚤pH= 6.0后再高压灭菌，灭菌参数是115 ℃下灭菌20 min；固体培养基在灭菌后再添加2 %的琼脂