“奥亭”牌复方磷酸可待因片口服液对果蝇的毒性及繁殖性能的影响1.doc

 PAGE 3 复方磷酸可待因对果蝇寿命的影响 奥亭止咳露为进口新配方复方磷酸可待因溶液,广泛用于治疗急性和慢性咳嗽。其不良反应包括：胃肠不适、腹痛、便秘、恶心、呕吐、口干、嗜睡及头晕，复方磷酸可待因溶液为全新配方的口服溶液剂，能消除咳嗽和伤风感冒所引起的多种症状。其成分为磷酸可待因、马来酸溴苯那敏、盐酸麻黄碱、愈创木酚甘油醚。本实验拟在常规培养基中加入“奥亭”复方磷酸可待因，配制成改良培养基培养果蝇。本实验选用果蝇观察各浓度复方磷酸可待因对果蝇的寿命影响 1 材料和方法 1.1实验材料及器具 野生型果蝇 放大镜，小镊子，麻醉瓶，培养瓶，毛笔，棉塞，恒温培养箱，冰箱 ，玻璃棒，移液管等 玉米粉，蔗糖，琼脂，丙酸，酵母粉，“奥亭”牌复方磷酸可待因口服液等 1.2实验方法 1.21培养基配制 称取琼脂6g，蔗糖52g，玉米粉40g，丙酸2ml，酵母粉2g，水320ml制成基本培养基。分成六分，分别加入复方磷酸可待因，配制成浓度为具体有待考虑，预实验 的培养基。分别标记1--6号。 先用水将琼脂加热溶解, 再溶入糖, 然后慢慢加入玉米粉, 边加边搅拌, 成为稀糊状后停火, 然后加入丙酸搅匀, 趁热分瓶( 以免冷却凝固无法分装) , 待冷却后加入酵母粉或酵母汁。 培养基分装前, 培养瓶应进行灭菌处理, 可干热灭菌也可湿热灭菌, 塞子一般用塑料( 聚氨基甲酸乙酯)泡沫或不吸水的棉花制成, 1.22培养条件 恒温培养箱中培养，温度为25，湿度为，每日光照8h。 1.23复方磷酸可待因对果蝇的毒性作用 收集羽化不足8小时的果蝇，用乙醚进行麻醉, 选取雌雄各80只，随机分为8个小组，每组雌性20只或雄性20只，分别放在不同浓度复方磷酸可待因的培养基中培养，自由取食，　将果蝇移入培养瓶中, 移入后, 须将瓶横卧, 以免果蝇粘在培养基上。培养基一般10天换上1 次, 以便使之保持充足的营养，每天定时记录两次果蝇的死亡数，直到亲本果蝇全部死亡。计算各受试验组半数死亡时间和平均寿命 2实验记录及结果分析 3实验结果的总结分析 实验操作流程 1，实验器材的消毒灭菌 10只培养瓶（带棉塞)，移液管，滤纸，麻醉瓶等 2，培养基的配制 称取琼脂6g，蔗糖52g，玉米粉40g，丙酸2ml，酵母粉2g，水320ml制成基本培养基。先用水将琼脂加热溶解, 再溶入糖, 然后慢慢加入玉米粉, 边加边搅拌, 成为稀糊状后停火, 然后加入丙酸搅匀, 趁热分瓶( 以免冷却凝固无法分装) 插入滤纸, 待冷却后加入酵母粉或酵母汁。 待培养基稍稍冷却些，一边分瓶，一边加入不同浓度的试剂 3，果蝇的培养 待两天后，取两瓶已长酵母的基本培养基接种果蝇，接种后放在恒温培养箱中培养，其余8瓶基本培养基放入冰箱待用。 4，果蝇的麻醉与雌雄分选 两周后收集羽化不足8小时的果蝇转移到麻醉瓶中，进行麻醉，分选出雌雄各80只，随机分为8个小组，每组雌性20只或雄性20只。 5，设置浓度梯度再次接种果蝇 将保存的8瓶基本培养基每两瓶分为一组，共4组。分别对应浓度的复方磷酸可待因溶液培养基瓶。分别将16组果蝇放在不同浓度复方磷酸可待因的培养基中培养，自由取食。做上标记1A,1B,2A,2B,。。。。。4A4B。（第一组做对照组） 6，实验观察与记录 每天定时记录两次果蝇的死亡数，直到亲本果蝇全部死亡。计算各受试验组半数死亡时间和平均寿命。 各浓度试剂对果蝇的影响 受试验组浓度性别平均寿命d最???寿命d1A雌性1B雄性2A2B3344 7，实验结果统计分析 讨论不同浓度的试剂对果蝇的寿命影响是否存在一定的关系，了解“奥亭”牌复方磷酸可待因片口服液的一定副作用及过量的危害性。 对于何时加入不同浓度的试剂这一问题！！？？ “介于试剂不耐高温的问题。” 第一种情况；正如我们上述实验流程办理。 第二种情况；我们在分瓶时，不加入试剂，只插入滤纸或脱脂棉。等到加入实验果蝇后，我们把不同浓度的试剂分别取23毫升滴在滤纸或脱脂棉上。 第三种情况；我们或者直接另取八只小培养瓶，分别在其中放入2克的脱脂棉于瓶底。各自分别加入不同浓度的试剂3毫升，接着转入雌雄分好的处女蝇，让其在这样的培养瓶中生活四天（资料说四天饿不死），每天两次记录死亡的果蝇数。急性毒性的测试. 附:平均寿命=所有果蝇的寿命总和/ 果蝇数目 最高寿命=最后死的十只果蝇的平均寿命