供精站制度人工授精实验室管理规范.doc

人工授精实验室管理规范 猪人工授精站实验室是精液检查、处理、贮存的场所，为了生产出优质的、符合输精要求的精液，一定把好质量关，保证出站的每一瓶精液的活力不低于0.7, 72小时之内保存活率不受影响,特对实验室日常运作做如下规定。 1、 实验室要求整洁、干净、卫生，每周彻底清洁一次； 2、 非实验室工作人员在正常情况下不准进入实验室，采精员也不准随意进入实验室； 3、 所有仪器设备应在仔细阅读说明书后，由专人按操作规程使用和维护保养；特别是高压蒸气灭菌器，双蒸水机使用时更应注意人身安全； 4、 各种电器设备应按其要求选择适应插座，除冰箱、精液保存箱、等外，一般电器要求人走断电，干燥箱无人时设定温度不应高于100℃； 5、 物品、器皿的清洗、消毒方法：所有器皿应以洗洁精或洗衣粉清洗干净，再以蒸馏水漂洗，60℃干燥（玻璃用品干燥温度可高于100℃）后，以锡纸包扎器皿开口，玻璃器皿180℃ 1小时进行干热灭菌，非耐热器皿、用具以高压灭菌器120℃、20分钟湿热灭菌； 6、 稀释液的配制、精液检查、稀释、分装一定按照人工授精操作规程进行； 7、 实验室仪器设备保持清洁卫生：实验室内使用的仪器设备，如显微镜、干燥箱、水浴锅、17℃恒温精液保存箱、37℃恒温板、电子天平等，必然保持清洁卫生，每次使用完必后用擦镜纸将显微镜镜头（目镜和物镜）擦试干净，有条件的话可每2周用二甲苯浸泡一次，保持清洁； 8、 采精室与实验室之间的传递口的两侧窗只有在传递物品时才能按先后顺序开启使用； 9、 实验室地板、实验台保持干净清洁； 10、下班离开实验室前一定检查电源、水龙头、门、窗是否关闭好，做到万无一失方可离开实验室，确保安全； 11、防火防盗，注意安全。 采精的操作规程 1、 采精员一手带双层手套，另一手持37℃保温杯(内装1次性采精袋)用于收集精液； 2、 饲养员将待采精的公猪赶至采精栏，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水（夏天用自来水）清洗干净，避免药物残留对精子的伤害； 3、 采精员挤出公猪包皮积尿，按摩公猪包皮部，刺激其爬跨假台畜； 4、 公猪爬跨假台畜并逐步伸出阴茎，脱去外层手套，将公猪阴茎龟头导入空拳； 5、 用手（大拇指与龟头相反方向）紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S’’状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转，公猪即可射精； 6、 用2—4张过滤纸过滤收集浓份精液于保温杯内的一次性采精袋内，最初射出的少量精液含精子很少，可以不必接取（有些公猪分2-3个阶段将浓份精液射出）直到公猪射精完毕，射精过程历时5-15分钟； 7、 采精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全角； 8、 采精完必后，由采精员或饲养员彻底冲洗采精栏； 9、?采精期间不准欧打公猪，防止出现性抑制； 10、采精频率：成年公猪每周2-4次，青年公猪（1岁左右）每周1次，采精公猪的使用年限一般为2—3年。最好固定每头公猪的采精频率； 11、公猪采精调教：①后备公猪7月龄开始进行采精调教；②每次调教时间不超过15分钟；③一旦采精获得成功，分别在第2、3天再采精1次，进行巩固掌握该技术；④采精调教可采用发情母猪诱导、观摩有经验公猪采精、以发情母猪分泌物刺激等方法；⑤调教公猪要有耐心，不准打骂公猪；⑥注意公猪和调教人员安全。 稀释液配制操作规程 1、 选购优质的成品稀释粉； 2、 使用前按稀释粉说明要求溶于定量的双蒸水中，可用磁力搅拌器助其溶解； 3、 用滤纸过滤，以尽可能除去杂质； 4、 稀释液配好，应及时贴上标签。表明品名，配置日期和时间，经手人等。 5、要认真检查已配制好的稀释液成品，发现问题及时纠正； 6、液态状稀释液冰箱4℃保存，不超过24小时，超过有效贮存期的编制稀释液应废弃。 精液的稀释操作规程 1、 精液采集后应尽快稀释，原精贮存不超过30分钟； 2、 未经品质检查或检查不合格（活力0.7以下）的精液不能稀释； 3、 稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过0.5℃,以精液温度为标准,来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作； 4、稀释时,将稀释液沿盛精液的杯(瓶)壁缓慢加入到精液中,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使之混合均匀，用力要轻微，防止精液受到冲击过大而死亡； 5、 如作高倍稀释时,应先进行低倍稀释（1：1-2）,稍待片刻后再将余下的稀释液沿杯（瓶）壁缓慢加入,以防造成“稀释打击”； 6、 稀释倍数的确定：活率≥0.7的精液,一般按每个输精剂量含40亿个总精子,输精量为80-100ml确定稀释倍数,例如: 某头公猪一次采精量是200ml ,活力为0.8,密度为2亿/ml,要求每个输精剂量是含40亿精子,输精量为80ml,则总精子数为200ml×2亿/ml=400亿,输精头份为400亿÷40亿=10份，加入稀释液的