抗原抗体反应应用.ppt

第三节 抗原抗体反应的应用;一、免疫沉淀与免疫凝集;;2. 凝胶扩散沉淀 ;单向免疫扩散：常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。;双向免疫扩散——沉淀线形状的变化显示抗原间是否存在共同的抗原决定簇。 ;3.电泳条件下的沉淀反应;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;;4.免疫共沉淀;免疫共沉淀原理图解;5.免疫凝集; 最常见的免疫凝集反应是红细胞凝集，即血凝反应。 血凝反应的抗体识别的抗原可以是红细胞表面的天然抗原，如血凝鉴定试验；也可以通过交联将红细胞连接上其他抗原，如早期的HBsAg血凝试验。;细菌的血凝试验常用来 对细菌进行鉴定与分型，如沙门菌鞭毛抗原的分析等。 免疫凝集试验虽然简便，但是受反应灵敏度的限制，在实际应用越来越少。;二、免疫标记;标记免疫技术=;1.放射免疫分析法;直接法与竞争法;竞争法基本原理;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;放射性同位素标记分析法示意图;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;2.酶联免疫吸附试验（ELISA） ( enzyme linked immunosorbent assay);(3) 测试过程;用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。（酶标抗原抗体复合物的分离） 加入底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。（显色反应）;酶;(4) ELISA技术类型;①双抗体夹心法(直接夹心法）;特点： 非竞争结合反应 常用于抗原的检测 适用于分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原，而不能用于小分子半抗原的检测 所用两种抗体分别针对同一个抗原分子的不同抗原决定簇 ;②间接法;;③捕获法（反向间接法）; ④直接法 用酶标记的抗原或抗体直接检测包被在酶标板上的抗体或抗原，其量与产物颜色成??比。;3、均相酶免疫吸附测定 ;酶放大免疫测定技术:（enzyme-multiplied immunoassay technique，EMIT）;⑤斑点酶免疫试验 (dot-ELISA);3. 荧光与发光免疫分析;基本原理 利用荧光素标记抗体，使之在涂片上或组织切片上与标本中的待检抗原特异结合，采用高发光效率的点光源，透过滤色板发出一定波长的光，使结合在标本上的荧光素被激发而产生荧光，借助荧光显微镜观察底物片上荧光染色形态，来判断有无待检抗原或抗体。 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;荧光免疫测定技术——时间分辨荧光免疫分析法;Eu;4.亲和标记的免疫分析;A蛋白;三、免疫定位分析;1.免疫荧光定位分析;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;2.酶标记免疫定位;（2）免疫印迹法（immunoblottingtest，IBT）;免疫印迹法原理示意图 ;3.免疫电子显微镜（IEM）技术;四、抗原抗体反应的其他应用;抗体+琼脂糖;2.生物感应器与抗体芯片;组成： 生物受体（抗体） 转导体 电子放大处理器 ;抗体芯片