第12章单克隆抗体.pptVIP

第一节 动物细胞制药基础知识;二、动物细胞代谢;三、动物细胞的分类;三、动物细胞的分类（二）;四、动物细胞培养的特性;五、动物细胞的培养基组成与制备 5.1. 培养的环境因素 ;5.3培养基组成; DMEM培养基（mg/L） L-盐酸Asg42，L-cys24，L-Asn584， L-盐酸His19，L-zle52， L-Leu52，L-盐酸Lys72，L-Met15，L-Phe36， L-Thr48， L-色氨酸8，L-酪氨酸36，L-缬氨酸48， 氯化胆碱，叶酸3，肌醇6，烟酸3，泛酸钙3，盐酸吡哆醛3， 核黄素0.3，硫胺素3，生物素3， NaCl 6800，KCl 400，CaCl2 200，MgSO4·7H2O 200， NaH2PO4·2H2O 150，NaHCO3 2000，Glucose 1000。 青霉素100U/ml，链霉素100U/ml，50mg/mL庆大霉素 10%小牛血清， 1%非必需氨基酸,0.1mol/L丙酮酸钠，1%谷氨酸胺 ;六、动物细胞培养方法与操作方式; 贴壁培养 成纤维细胞、心肌细胞、平滑肌细胞和成骨细胞等中胚层细胞。上皮细胞、皮肤细胞等外胚层细胞和内胚层细胞。 滚瓶系统培养→微载体系统培养法（搅拌罐） （搅拌槽，中空纤维管） 粘附比率（玻 璃、纤维素、明胶等增加了比表面积）。 接种细胞密度104/cm2→(1～2)×105/cm2(劳动密集型);6.2 细胞培养操作方式;七、动物细胞大规模培养系统;抗体（Antibody.Ab）是有抗原刺激机体后，由淋巴B细胞经分化增殖的浆细胞合成的分泌的，能与响应抗原特异结合并具有多方面免疫功能的球蛋白。 免疫球蛋白（Immunoglobin,Ig）是只具有抗体活性或其化学结构与抗体相似的球蛋白。 Ab与Ig是同义体，已知相应配体的Ig称为抗体。 ; ? 理化性质及免疫学特性 是机体体液免疫的主要成分 ;三、抗体条件： 1.只有脊椎动物（鱼类以上）的浆细胞才能产生； 2.必须要有抗原物质的刺激； 3.能与相应的抗原发生特异性结合； 4.其化学本质是一类具有免疫功能的球蛋白。;三、抗体分子的结构和功能;抗体的功能区（domain）折叠成球状??构（AA排列顺序因抗体的特异性而异）称可变区（Variable region, 简称V区），包括3个互补决定区（VH，VL）（compiementarity-determining region;CDR） 羟基-侧，AA排列顺序较恒定→恒定区（constant region ,c区） H链上有3个C区，CH1，CH2，CH3 L链上有1个C区，CL 铰链区：H链的中间部分肽段。“Y”→“T”互变，不结合抗原，CH2区的补体结合位点被掩盖。;木瓜蛋白酶作用后： Fab片段：抗原结合活性和特异性，一条完整 的L链和H链的VH区以及CH1 Fab片段 ：两条H链的CH2和CH3区域 Fc片段：无抗原结合活性，但是抗体结合了抗 原以后，激活机体免疫反应的主要部位。 ? ; 主要激活以下免疫反应： (1)激活补偿功能系统。 (2)产生抗体依赖性细胞介导毒素。 (3)可结合巨噬细胞的Fc受体，使巨噬细胞吞食并毁灭抗原—抗体复合体。 ;3.2 抗体的功能; 各类Ig各司其职，共同完成的机体免疫防护任务 （1）IgG 最主要的免疫球蛋白，15%， 参与几乎所有的体液免疫反应。 作用：免疫凝集、免疫沉淀、免疫调理、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）、激活补体系统、固定细菌和中和病毒。 （2）IgA 机体粘膜局部防御的重要作用因素 功能：杀菌