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猪呼吸道疾病综合征常见病毒多重PCR方法的建立及应用.pdf

华北农学报 ·2014 ,29(3):64-67 猪呼吸道疾病综合征常见病毒多重PCR方法的 建立及应用 1 1,2 1,2 1 1,2 1,2 1,2 赵  朴 ,郑玉姝 ,赵  坤 ,李任峰 ,胡建和 ,王三虎 ,刘兴友 , 1 1 陈金山 ,刘俊伟 (1.河南科技学院动物科学学院,河南 新乡  453003; 2.动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心,河南 新乡  453003)     摘要:为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪 流感病毒(Swine influenza virus,SIV)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒2 型(Porcine circovirus2, PCV2)4种病毒的多重PCR,分别针对PRRSV、SIV、PCV2 和PRV 保守序列设计4 对特异性引物,建立同时检测这4 种病毒的多重PCR,并对采自呼吸障碍病猪的病料进行检测。 结果显示,PRRSV、SIV、PCV2 、PRV 扩增产物分别是 275,650,482,359 bp,检测最小DNA量分别是1.5,7.5,4.3,2.7 pg;检测采自河南省的100份样品,总阳性率为95% (95/ 100),其中PRRSV、SIV、PCV2 和PRV 阳性率分别是62.1%(59/ 95),33.7%(32/ 95),66.3%(63/ 95),26.3% (25/ 95),混合感染率达69.5%(66/ 95)。 表明建立的多重PCR方法敏感、特异、快速,可用于猪呼吸道疾病综合征常 见病毒的检测。 关键词:猪呼吸道疾病综合征;猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪流感病毒;伪狂犬病病毒;猪圆环病毒2 型;多重PCR 中图分类号:S855.3    文献标识码:A    文章编号:1000-7091(2014)03-0064-04 Development and Application of a Multiplex Polymerase Chain Reaction for Major Viruses Causing Porcine Respiratory Disease Complex 1 1,2 1,2 1 1,2 ZHAO Pu ,ZHENG Yu-shu ,ZHAO Kun ,LI Ren-feng ,HUJian-he , 1,2 1,2 1 1 WANG San-hu ,LIU Xing-you ,CHENJin-shan ,LIUJun-wei (1.Department of Animal ScienceandTechnology,HenanInstituteof ScienceandTechnology,Xinxiang  453003,China; 2.HenanEngineering Research Center of Animal Diseaseand ResiduePrevention and Control,Xinxiang  453003,China) Abstract:To detect porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV),swine influen

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