第3篇核酸组化染色(六).pptVIP

第五节核酸 ;世上物质万种，名目繁多，但不管是动物还是生 物，都含有核酸，它是生物在发育，繁殖，遗传 和变异的主要物质，因而它成为人们的主要研究 对象，在病理学的范畴中，主要是在形态学方面 对核酸的显示。 ;核酸分为脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）和核 糖核酸（ribonucleic acid, RNA）两大类。组成核苷酸的物质有 含氮的有机碱或称为碱基、戊糖和磷酸三种。 在正常的情况下， DNA和RNA都是由核苷酸组成的，它们的含量约占细胞干重的5- 15%，约90%的DNA存在于细胞核内，而少量的 RNA（约 10%）存在于细胞核中，RNA主要存在于细胞质中，约占75% ， 另有10 % 在细胞核内，15%在细胞器中。[29] RNA分为核蛋白 体RNA（rRNA）、转运RNA（tRNA）和信使RNA （mRNA）， ;人体在合成蛋白质始终遵循着“中心法则”由DNA 到RNA再到蛋白质这一过程式不可以有任何差错 的，否则细胞便不能合成应有的蛋白质，甚至会 合成错误的蛋白质，如癌蛋白，于是出现了癌细 胞，导致癌症发生。 ;从分子学的水平角度来认识癌细胞，癌细胞也可分为癌细胞核、癌细胞浆和癌细胞膜。中心是癌细胞核，内部有染色体，染色体包含一条很长的DNA链。 该链由不同的基因片断组成。癌细胞在发生发展过程中，是这些基因在起作用的。 ;细胞在受到各种有害物质如化学物质、病毒等毒害时，细胞上DNA的核苷酸就会和这些物质结合，形成加合物，直接损害核苷酸。基因的损害，功能的丧失，必定要有其它的基因来补充，突然间的点面上的基因又多了，然而这些增多的基因恰恰是加快细胞生长的蛋白，或者是抑制细胞凋亡的蛋白对应的基因， 于是乎细胞生长加速增快，细胞不会凋亡，无休止的生长，这就是肿瘤细胞的典型生长情况 . ; 癌细胞的形成也是多基因的变异，一个基因的变异不会发展成癌细胞，只有在多基因的变异的情况下才可以发展成癌细胞。基因的变异是指某些基因扩增，某些基因减少了，从目前的认识水平上看，扩增的基因有：AP-1Ctre、NF-KbCtre、ETsctre、C-Fos、C- jun、Myc、Ras、Survivin等。 ;被破坏的基因有：BRCA1、BRCA2、P53、 P63、P73、Rb、P16等。 对于这些基??? 的检测目前应用的技术有免疫组织化学技术、包 括原位分子杂交技术和PCR技术等。 ;（一）、扩增基因各自的功能。 1、C- jun癌基因。 C-jun癌基因与鸟类肉瘤 病 毒17的转化基因具有同源性，是早期应答基因家 族成员之一。 ;2、 C- myc基因。C-myc基因属于 myc 家族。同属于此家族的还有N- myc 、L-myc， 其中C- myc与 胰腺癌的关系密切，该基因定位8 q24.1 在细胞核内结合于单链或双链DNA上，对转录过程突施调控。C-myc的表达活性与细胞生长分裂速度密切相关，而且也是细胞凋亡的潜在诱导因子，C-myc基因的表达与乳腺癌、结肠癌和膀胱癌等肿瘤的增殖有关。并与结肠癌的预后有关。 ; 3、C-fos。C-fos是一种转录活化因子（AP- 1），与C-jun 原癌基因产物形成一种复合物， 参与多个基因的转录和调节。正常组织几乎不表 达或弱表达。 4、Survivin（存活素） 它是细胞凋亡抑制基因 家族中的一个成员，在于细胞周期中的G2\M其 中有表达，在许多肿瘤中有表达。 ; 5、NF-Kb。NF-Kb是由一组结构上相关的蛋 白家族组成。 （二）、被破坏基因的各自功能: 1、 BRCA1：它是一种BRCA1 基因产物，是乳腺癌的易感基因之一 ，具有对乳腺癌等肿瘤的抑制作用，BRCA1功能的丢失或者增加都可以造成对乳腺癌和卵巢癌的易感性。; 2、BRCA2：BRCA2又称为乳腺癌易感蛋白，遗传性BRCA2 基因突变可以增加乳腺的家族性高发的危险性，且肿瘤发生与野生型等位基因丢失相关，BRCA2编码为3418氨基酸蛋白，与其它蛋白很少有同源性. ; 3、P53。P53是一种抑癌基因，分为野生型和突变型两种。应用石蜡切片免疫组织化学检测获得阳性的 P53 主要是突变型。这是由于突变型的半衰期时间较长，约为4-8 小时，而野生型的半衰期时间较短， 大约仅有20分钟左右，因此应用石蜡切片根本无法完成。P53可作为细胞凋亡中的一个调控因子。; 4、P63。P63 是P53基因家族成员之一，该基因定位于染色体3 q27-28，编码6种以上主要异构体分别待遇转录激酶活性，死亡诱导活性（TAP63）和显色失活活性。在胚胎时期，多种上皮和器官发育需要P63蛋白，P63 在肌上皮细胞中表达，且作用 优于SMA，在肌纤维母细胞中不表达。 ;5、P16。P16是细胞周