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第7章免疫分析法.pptVIP

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第7章免疫分析法

第七章 免疫分析法; 抗原的概念;1. 抗原的免疫原性;一、异物性;二、一定的理化性状;三、完整性;四、宿主遗传性;2. 抗原的特异性;一、抗原决定簇;4、大小 抗原决定簇的大小与相应抗体的抗原结合部位相当。 一个蛋白质抗原决定簇含5-7个氨基酸残基 一个多糖抗原决定簇含5-7个单糖 一个核酸半抗原决定簇含6-8个核苷酸 5、抗原结合价(antigenic valence)是指能和抗体分子结合的抗原决定簇的总数。 半抗原为一价 天然抗原的分子结构复杂,分子表面有多个决定簇为多价 ;;三、共同抗原和交叉反应;3. 抗原的分类;根据抗原颗粒大小和溶解性分类: 颗粒性抗原和可溶性抗原。 根据抗原的来源: 外源性抗原(天然抗原和人工抗原), 内源性抗原。 ;胸腺依赖性抗原(thymus-dependent antigen,TD-Ag): 这类抗原须在抗原提呈细胞及TH细胞的参与下才能激活B细胞产生抗体。绝大多数蛋白质抗原属于TD-Ag。 胸腺非依赖性抗原(thymus-independent antigen, TI-Ag):这类抗原刺激B细胞产生抗体时不须T细胞辅助。少数的多糖抗原属于TI-Ag。 ; 表3 TD-Ag和TI-Ag的比较;超抗原(Superantigen,SAg):;超抗原的特征:;抗体(antibody,Ab):是由抗原进入机体刺激B细胞分化增殖为浆细胞而合成并分泌的一类能与相应抗原发生特异性结合并产生免疫效应的含有糖基的球蛋白。抗体分布于体液(血液、淋巴液、组织液及粘膜的外分泌液)中,主要存在于血清内。 ;1. 抗体(antibody, Ab)功能性概念 是由抗原刺激而产生并能与刺激其产生的抗原发生特异性结合的、具有免疫功能的球蛋白。抗体主要存在血清中,也存在于呼吸道粘膜液、小肠粘膜液、唾液以及乳汁等其它体液中。 2. 免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)结构性概念 具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白。所有抗体都是免疫球蛋白,但是并非所有免疫球蛋白都是抗体。;二、抗体的生物学活性 (一)特异性结合抗原 超变区-表位 静电力、氢键、范德华力 可逆 影响因素:PH、温度、电解质 中和效应 — 中和毒素和病毒 与Ag结合 — 促吞噬细胞吞噬;(二)激活补体系统 Ab(IgM、IgG)+ Ag → C1q → 补体经典途径 IgG4、IgA和 IgE的凝聚物 → 补体旁路途径 (三)结合Fc受体 (1) 介导超敏反应:Ⅰ型超敏反应; (2) 调理作用(opsonization):IgG + 抗原(颗粒性) → FcγR(单核、巨噬细胞及中性粒细胞)→ 促 吞噬细胞吞噬; (3) ADCC:IgG + 抗原(靶细胞) → Fc γR(NK 细胞)→ 杀伤靶细胞。 (四)通过胎盘和粘膜;;2.生物学活性 (1)通过胎盘(新生儿抗感染); (2)激活补体(裂解细胞); (3)调理作用(促进吞噬); (4)介导ADCC(细胞毒作用)。 3.实际意义 (1)抗感染; (2)自身抗体 → 自身免疫病; (3)介导变态反应(Ⅱ、Ⅲ型); (4)封闭抗体 → 肿瘤细胞逃逸; (5)亲合层析法 — IgG纯化; (6)免疫学检测。 ;抗体分子的基本结构是由四肽链组成的。即:由二条相同的分子量较小的肽链(轻链)和二条相同的分子量较大的肽链(重链)组成。;;5. 单克隆抗体和基因工程抗体 一、多克隆抗体(polyclonal antibody) 1. 定义:抗原分子通常具有多个抗原决定簇,动物免疫后可刺激多种具有相应抗原受体的B细胞发生免疫应答,因而可产生多种针对不同抗原决定簇的抗体。这些由不同B细胞克隆产生的抗体称为多克隆抗体(polycolonal antibody, PcAb)。 2. 实际意义 (1)预防、治疗感染性疾病(特异性差,可发生超 敏反应) (2)临床诊断;二、单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb) 1. 定义

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