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果蝇和摇蚊幼虫唾液腺细胞巨大染色体的观察
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果蝇和摇蚊幼虫唾液腺细胞巨大染色体的观察
目的 观察果蝇和摇蚊幼虫唾液腺细胞巨大染色体的形态特征。
实验前的思考 染色体的数量和形态特征跟生物体的性状遗传有着密切的关系,而染色体的形态特征又不易观察,科学家发现果蝇幼虫的唾液腺细胞染色体特别大,比果蝇的其他体细胞染色体要长100~200倍,体积大上千倍,摇蚊幼虫的唾腺细胞的染色体,也比一般细胞大100倍以上。在一般光学显微镜下就能清楚地看到,这些都是观察染色体理想的材料。
材料器具 果蝇三龄幼虫;解剖针,镊子,载玻片,盖玻片,解剖镜或有支架的放大镜,吸水纸;0.75%氯化钠溶液,乙酸洋红或乙酸地衣红染液,1N盐酸,0.4%氯化钠溶液。
方法一 观察果蝇唾液腺细胞巨大染色体
步骤
1.取唾液腺 取一块洁净的载玻片,在载玻片中央滴一小滴0.75%氯化钠溶液(相当于果蝇的生理盐水)。用解剖针挑起一条肥胖的充分发育的果蝇三龄幼虫,放入载玻片上溶液中,生理盐水不宜多,以减少幼虫活动。把载玻片放在解剖镜或放大镜下,左手用镊子夹住幼虫体1/2处,右手持一解剖针,压住头部(外形似一个黑色小点),轻轻地向前拉,当拉出头部时,腺体随同内脏一起拉出。如果头部拉断,腺体没拉出,可以用解剖针从镊子附近的腹部缓缓地向头端挤压,这样也可以压出唾液腺。拉出后借助解剖镜或放大镜放大唾液腺,细心分离,理出双叉形囊状腺体。如用放大镜看不清,可放在低倍显微镜下观察区别,光线调弱一些,小心剔除腺体周围乳白色的脂肪组织和身体的残余部分,在载玻片中央仅留下具有唾液腺的部分(见图)。
在材料上滴加一滴0.4%氯化钠溶液,低渗处理2分钟,使唾液腺细胞膨胀。
2.染色 小心吸去材料周围的溶液,先滴2滴1N盐酸在唾液腺上,水解2分钟(不能超过3分钟)。然后用清水轻轻滴洗。滴洗方法是:滴入清水,用吸水纸从材料旁边吸水(绝对不能碰到实验材料,否则材料就被纸吸附而丢失)。这样反复几次,洗去盐酸。用吸水纸吸干周围的水分,再在材料上滴2滴乙酸洋红染液,染色10分钟。如果气温过低,可把载玻片放在酒精灯上来回移动加温(不可煮沸),以加速染色。
3.压片 在染好色的材料上,盖上盖玻片,再覆以二三层吸水纸,用手掌用力压一下,使细胞中染色体散开,压片时注意不能移动盖玻片,必要时再压一次。
4.观察 先用低倍显微镜观察,找到染色体分散的细胞(参考右图),再用高倍镜观察。
分析和讨论 实验结果能观察到有数个染色体分散的细胞。
1.可以看到每个唾液腺细胞都有数条形似飘带的染色体,且在每条染色体上有粗细不等的横纹,或叫做带,一般认为横纹是基因所在的位置。
2.果蝇易采集和培养,染色体数目少(仅4对),体形大,(唾液腺染色体更大)。果蝇的染色体中,其中有一对是性染色体(x染色体是棒状,y染色体是钩状),另3对是常染色体,分别定为ⅡⅡ、ⅢⅢ、ⅣⅣ(见图)。
3.果蝇唾液腺细胞染色体特别大,是因为唾液腺细胞中染色体都处于同源染色体配对的阶段,同时唾液腺细胞没有分裂能力,所以染色体既大又集中。一般情况下,染色体只有在细胞分裂的中期才能较清楚地观察到。
(吴天眷)
方法二 摇蚊幼虫唾液腺细胞巨大染色体观察
材料器具 摇蚊三龄幼虫;放大镜,解剖针,显微镜,载玻片,盖玻片,镊子,吸水纸;生理盐水(0.65%氯化钠溶液),改良碱性品红染液。
步骤
1.改良碱性品红染液的配制 取0.3克碱性品红溶于10毫升70%乙醇中。把它倒入90毫升5%苯酚溶液中。再在它里面加入冰乙酸和甲醛各10毫升,成为原液。取原液20毫升加入45%冰乙酸80毫升,再加入1克山梨醇,摇匀溶解后即成染液。
2.采集 南方各地区每年3~5月和9~11月(北方稍迟些)都可在池塘、池沼地、住宅区的小沟积水中,水浮莲和西洋菜根上采集到幼虫。幼虫呈红色,俗称“血虫”,体长6~12毫米,体节11~13节。
3.装片的制作
(1)选取一条较大的三龄幼虫放在载玻片中央的生理盐水(0.65%氯化钠溶液)中。
(2)两手各持一支解剖针,左手的解剖针平按在虫体前端大约在体长1/3处(不让它移动),右手的解剖针按在头部,轻轻向前拉动,就可把头拉开,唾液腺也随之拉出(如果唾液腺拉断或未能拉出,可以用解剖针在虫体前部1/3处轻轻向前挤压出来)。两个唾液腺是椭圆形环状,浅黄色,如果放在低倍镜(5×10或5×5)下检查,发现每个唾液腺的细胞数目清晰可数,一般由18~20个细胞组成,唾液腺是由单层细胞构成的环状体,每个细胞的细胞核也可清楚见到。每个唾液腺都有一条唾液腺管连着。
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