20130118葛根中黄酮类化合物总含量的测定报告.doc

葛根中黄酮类化合物总含量的测定结果 1葛根样品来源 样品来源：武冈市和鑫农产品有限责任公司。 样品编号名称原材料状态F粉葛片状（测定黄酮含量前粉碎处理）H黄金葛片状（测定黄酮含量前粉碎处理，粉碎后纤维残留很明显）CW超微粉碎 （大编织袋装）超微粉碎CZ商品包装 （小包装上有成真字样）粉末状2葛根黄酮含量测定的方法及步骤 采用传统浸提法，以乙醇为提取溶剂。在参考文献资料的基础上，确定简要的步骤为：提取温度60℃，提取时间为120 min，乙醇的提取浓度为70%，固液比为1:20。每个样品重复三次。 3标准曲线 黄酮类化合物在碱性介质中与硝酸铝作用后，生成黄酮的铝盐络离子（低浓度为浅红色），呈黄色，可通过紫外-可见分光光度法定量测定黄酮类物质的含量。 4结果与分析 4.1最大吸收波峰的确定 4.2标准曲线的绘制 表1 芦丁标准曲线的绘制 试管编号123456样品100微克/mL芦丁标准样品 (mL)012345395% 乙醇 mL54321025% NaNO2 (mL)110% Al(NO3)3 (mL)1-（摇匀后放置6 min）4% NaOH (mL)4-（摇匀放置15~20 min）吸光度（Abs）=502 nm00.0710.1610.2380.3160.411 从上图可以看出回归方程的决定系数r2=0.9982，求其平方根得到相关系数r=0.99909。查找相关系数临界值表，α=0.05时， r0.05(n-2)=r0.05(4)=0.811；α=0.01时，r0.01(n-2)=r0.01(4)=0.917。由于r r0.01(4)，说明x与y极显著相关，即标准配制过程无问题或比色操作规范，上述标准曲线可以用于葛根黄酮类物质总含量的测定。 4.2样品中黄酮类化合物总含量的测定结果 表2 不同葛根样品中黄酮类化合物的总含量 试管编号粉葛黄金葛超微粉碎成真F1F2F3H1H2H3CW1CW2CW3CZ1CZ2CZ3吸光度Abs0.2130.2590.2240.2490.2510.2240.400 0.4150.4340.3150.2980.293黄酮含量（μg/mL）25.4 30.8 26.7 29.6 29.9 26.7 47.6 49.4 51.7 37.5 35.5 34.9 黄酮含量平均值（μg/mL）27.628.749.636.0总黄酮得率 （μg/g) 或（mg/kg）1933.32011.13469.42516.7超微粉碎成真黄金葛粉葛4.3分析 由于粉葛及黄金葛的原料都是块状的，实验室的普通粉碎机粉碎后的粉末颗粒较大，特别是黄金葛粉碎后还残留大量的纤维状物质，这些都会影响总黄酮类物质的提取效果。超微粉碎的颗粒较小，总黄酮类物质的提取含量则相对较高。