2015年各地生物真题汇编基因工程.docx

2015年各地生物真题汇编：基因工程 选择题： （2015北京，5） 1、在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ） A、用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B、用选择培养基筛法导入目的基因的细胞 C、用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合 D、用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽 【答案】C （2015广东，双选，25）2 .图9为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图 下列叙述正确的是 过程①所用的人β-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得 过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植 过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 过程④人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译 【答案】AC 二 简答题： （2015福建，33）1.【生物-现代生物科技专题】（10分） GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： （1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是 。 （2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的 限制酶进行酶切。 （3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 （4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的 与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行 培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 【答案】（1）使细胞分散开 （2）XhoI （3） eq \o\ac(○,2) （4）抗体 传代 【解析】选修本的理论测试重点在相关工程的理论基础和操作流程，一般题目要求难度不大，以记忆为主，记忆以操作流程为主干辅以理论基础。 （2015江苏，32）2 . (9 分)胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图 1 是该方法所用的基因表达载体,图2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。 请回答下列问题: (1)图1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。 (2)图1 中启动子是摇 银摇 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 。 (4)茁-半乳糖苷酶与胰岛素A 链或B 链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的 A 链或 B 链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 。 (6)根据图2 中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。 你的推测结果是 ,理由是 。 【答案】（1）终止子 （2）RNA聚合 作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 （3）限制酶和DNA连接酶 （4）防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解 （5）β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸 （6）至少2个 两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸的R基中可能还含有游离的氨基 （2015四川，9） 3 ．（11分）将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T－DNA片段能转移到植物细胞中）。 （1）过程①需用同种＿＿＿＿酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用＿＿＿＿培养基。 （2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让＿＿进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加＿＿＿＿以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是＿＿＿＿。种植转基因抗虫棉能减少＿＿＿的使用，以减轻环境污染。 答案：（1）限制　　选择　　 （2）T－DNA片段　　筛选出含目的基因的受体细胞