21微生物的实验室培养规范训练(人教版选修1).doc

专题2　微生物的培养与应用 课题1　微生物的实验室培养 (时间：30分钟　满分：50分) 考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难培养基成分、类型及配制1、2无菌操作技术56菌种的接种与纯化技术3、478一、选择题(每小题4分，共20分) 1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是 (　　)。 A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一 解析　该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。 答案　B 2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是 (　　)。 A．操作顺序为计算、称量??溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置 解析　制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50 ℃左右时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却凝固约5～10 min后还需倒置。 答案　A 3．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是 (　　)。 A．接种时再拿起来方便 B．在皿底上标记日期等方便 C．正着放置容易破碎 D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 解析　平板倒置主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。 答案　D 4．下列有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 (　　)。 A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C．适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落 解析　稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。用不同稀释度的菌液接种，只有在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，才能够在培养基表面形成单个菌落，而不是所有培养基上均可出现单个菌落。 答案　D 5．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是 (　　)。 A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法 B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上 C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异 D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4 ℃保藏的方法 解析　对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌，将1 mL菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20 ℃的冷冻箱中保存。 答案　D 二、非选择题(共30分) 6．(10分)大肠杆菌通常容易居于人的结肠中，对人体无害，但某些菌株能造成尿路感染和腹泻。请回答下列问题。 (1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行______(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和______(消毒、灭菌)；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的______。 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的______________________________________________________。 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____________________________________________。 (6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 解析　本题主要考查微生物培养的综合知识。消毒一般只是消灭体表的微生物，而灭菌是杀灭所有的微生物及孢子等。观察细菌等微生物的有无通常是通过培养来观察菌落的形状、颜色等。 答案　(1)温度　酸碱度　易培养　生活周期短　(2)灭菌 消毒　损伤DNA的结构　(3)比例合适　(4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生　(6)灭