1-基本技术.ppt

第一章 基本技术实验室设置基;第一节 实 验 室 设 置实;细胞工程实验室的基本要求实验准;基 本 实 验 室 准备室 ;辅 助 实 验 室细胞学实验室;基本设备配置基本设备灭菌设备光;天平 ，冰箱 ，酸度计 ，纯水;活性成分过滤灭菌接种工具随时消;防止空气对流定期消毒;保持干燥,控制光照和温度精确培;培养容器与用具玻璃容器塑料容器;倒置显微镜研究显微镜激光共聚焦;第二节 细胞工程的基本技术一;一、无菌操作技术 ;一、无菌操作技术洗涤技术灭菌技;洗 涤 剂合成洗涤剂铬酸洗涤液;常用的铬酸洗涤液配方成 分强;玻璃器皿洗涤 新的玻璃器皿;塑料用品洗涤 一般用合成洗涤;培养基：湿热灭菌，即高压高温蒸;活性成分过滤灭菌接种工具随时消;培养基体积与灭菌时间的关系培养;二、细胞培养技术 ;二、细胞培养技术 ?动物细胞;动物细胞培养;原代培养 (prima;细胞株(cell strain;Hela细胞（左）、CHO细胞;三、细胞融合技术?细胞融合（c;三、细胞融合技术 ;细胞融合 动物细胞融合（图1;无标题;细胞融合;四、单克隆抗体技术 1;单克隆抗体技术;无标题;细胞拆合与显微操作技术;无标题;Knockout Mice ;基因敲除;基因敲除示意图（1）;基因敲除示意图（2）;基因敲除原理;Knockout Mice;第三节 培养基及其配制 培养基;培养基基本成分水大量元素微量元;无 机 盐 类大量元素 培养;有 机 成 分糖 维生素 ;植 物 激 素生长素细胞分裂素;水 离体培养中，水既是培养基;其它附加成分琼脂活性炭附加复合;常用培养基配方常用培养基配方：;培 养 基 配 制 ;植物激素配制 植物激素一;植物组织培养 ;一般方法;经过锻炼的小苗，可以和一般植物;第四节 外植体接种培养 植物;植物材料的培养与外植体选取外植;外植体的来源 外植体（expl;供体植株的管理 a. 避免昆虫;外植体取材 a. 根据培养需求;预备阶段(1).选择合适的外植;外 植 体 灭 菌外植体清洗整;消 毒 剂使用浓度(%)消;接种培养及培养条件的控制外植体;光照包括：时间、强度和光质；光;在大多数情况下，适温有利于细胞;培养温度(℃)接种时单个细胞平;通常使用的pH值范围是5.5～