气相色谱法测定烘焙食品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚（BHA）和2，6―二叔丁基对甲酚（BHT）.docVIP

PAGE  PAGE 4 气相色谱法测定烘焙食品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚（BHA）和2，6―二叔丁基对甲酚（BHT） 　　摘要：利用冷冻过滤优化抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚（BHA）和2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）的萃取条件，通过加标回收率实验（BHA、BHT回收率均在95%以上，相对标准偏差小于0.2%）评价了方法的准确性。建立了快速、简单、准确的检测烘焙坚果食品中BHA和BHT的方法。实验表明本方法具有很好的回收率和重复性，对检测烘焙坚果食品具有很好的应用前景。 　　关键词：GC-FID；烘焙坚果食品；BHA；BHT 　　中图分类号：R917 文献识别码：A 文章编号：1001-828X（2016）006-000-02 　　引言 　　食用油脂和含有食用油脂的食品在不适当的保存条件下或者超过保质期就会发生酸败现象。为了避免酸败现象或者延缓其发生时间，通常会加入BHA、BHT或者其他的抗氧化剂和防腐剂，然而资料表明，BHA有潜在的致癌性，BHT危险小一些，不过动物实验也发现它能致癌。因此，研究食品中的BHA、BHT的检测方法就十分重要。目前检测BHA、BHT等抗氧化剂的方法有气相色谱法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等。利用这些方法提取烘焙坚果食品中的油脂都需要将样品中油脂提取出来，然后再通过柱层析或者凝胶色谱方法去除掉脂肪。由于柱层析与凝胶色谱法操作繁琐、试剂消耗大等。因此，本文用甲醇直接提取油脂中的BHA、BHT，提取液经过冷藏静置后过滤，减压浓缩至近干用乙醇定容。待分析。 　　一、实验部分 　　1.材料试剂 　　石油醚（30℃～60℃）、甲醇、均为分析纯；BHA、BHT标样，纯度均高于99%；氮气，纯度99.999%。 　　2.仪器与设备 　　GC-2010（日本岛津公司）-氢火焰离子化检测器（FID）、振荡器、旋转蒸发仪、离心机、冰箱。 　　3.色谱条件 　　色谱柱为DB-WAX石英毛细管柱，长30m、内径0.25mm、膜厚0.25μm；柱温：初始温度为80℃，保持1min，以10℃/min升温至230 ℃，保持8min；进样口温度150℃，不分流进样，进样量1μm。检测器：FID 温度250℃。载气流量：氮气4.38 mL/min、氢气40mL/min、空气400mL/min。 　　4.样品处理 　　（1）脂肪的提取 　　称取样品50～100g（视样品脂肪含量而定），混合均匀，置于250mL具塞锥形瓶中，加入适量石油醚浸泡试样，震摇10min静置2-3h后快速滤纸过滤，减压回收溶剂残留脂肪备用。 　　（2）样品的制备 　　准确称取样品1-2g（精确至0.001g）于15 mL离心管中，用10 mL甲醇分3次萃取（三次比例为4mL、4mL、3mL），震荡2min/次，静置10min后吸取甲醇溶液合并于15mL离心管中（如果静置后乳化较为严重，可以3000rmm离心3min），合并好的甲醇溶液置于冰箱-4℃冷冻1h后用快速定性滤纸过滤，再用约3mL甲醇冲洗滤纸上残渣，合并甲醇溶液，减压浓缩至近干，用乙醇定容至2.0mL，该溶液为待测溶液。 　　二、结果与讨论 　　1.色谱条件的优化 　　本实验采用DB-WAX毛细管柱，以及梯度升温的方法测定混合标样的含量和分离情况，结果如图1所示。图1表明，随着温度的升高BHA、BHT能够达到很好的基线分离，且峰形较好。 　　2.线性关系及检出限 　　分别绘制BHA、BHT的标准曲线，再0.02～0.5mg/L范围内两种物质的浓度与峰面积的线性关系良好，其线性方程及相关系数见表1。以三倍的信噪比（3S/N）计算检出限。 　　3.方法的回收率 　　取已知不含待测物的样品，分别添加80ng和160ng的BHA和BHT标准品，每一梯度取3个样待测，同时定容2mL经0.45??m微孔滤膜过滤后，按照1.3节色谱分析条件平行测定三次，计算回收率。实验表明，BHA、BHT的平均回收率分别为95.5%、95.2%，见表2。 　　4.烘烤榛子仁样品的分析检测 　　实验采用本研究的方法，对3批次实际样品惊醒测试，结果见表3。监测数据表明，烘烤榛子仁中BHA、BHT的含量均为0。图2为烘烤榛子仁样品色谱图。 　　三、结论 　　本文采用冷冻过滤提取烘烤榛子仁中的油脂作为前处理，并用气象色谱法对烘烤榛子仁样品中的BHA、BHT进行了检测。检测结果显示，BHA、BHT在80ng-160ng添加浓度范围内，回收率均大于95%，相对标准偏差均小于0.2%。该方法简单、高效，而且其准确性和重复性较好，可用于检测坚果食品中抗氧化剂的限度。 　　参考文献： 　　[1]伍先绍，柳永英，赖丽琼.液相色谱法同时快速测定植物中TBHQ、BHA/BHT探讨[