第三章 人工授精技术.ppt

韩雪蕾;一、人工授精技术的定义 二、人工授精技术的优越性 三、人工授精技术的技术程序 四、精液的保存技术 五、人工授精技术与胚胎移植技术的关系 六、牛繁殖技术进展 ; 人工授精技术是利用器械采集雄性动物的精液，经检查和处理后，再用器械将精液输入到发情雌性动物的生殖道内，以代替自然交配而繁殖后代的一种技术。 人工授精技术经历了三个发展阶段： 试验阶段 生产性实用阶段 冷冻精液阶段;二、人工授精技术的优越性： 提高优良种公畜的配种效能和种用价值，扩大配种头数 牛：自然交配——1：40～1：100头/年， AI——1：6000～1：12000头/年。 大幅度减少种公畜的头数，降低饲养成本 ;加速家畜品种改良，促进育种工作进程 防治各种疾病，特别是生殖道传染病的传播（布氏杆菌病，衣原体感染，沙门氏菌病，病毒性腹泻） 有利于提高母畜的受胎率 克服公母畜体形悬殊而出现的交配困难，克服“无障碍配种” 有利于种质交流和扩大配种地域 ;三、人工授精技术的技术程序 人工授精技术的技术程序： 采精 精液品质检查 精液稀释 精液的分装 精液的保存（液态保存、冷冻保存） 精液的运输 精液的解冻与检查 输精 概括来说，动物人工授精技术由采精技术、 精液处理技术和输精技术三大部分组成。;1.采精 家畜的采精方法 ： 假阴道法 适用于各种家畜（犬除外）。 手握法 适用于猪。 按摩法 适用于禽类、犬科动物（对不能站立的牛也可用） 电刺激采精法 适用于野生兽类的采精方法，（常需用氯胺酮等镇静剂保定，但采出的精液往往射精量大而精子密度很低；对某些动物如家兔只能引起阴茎强直性勃起而不射精）。 ;2.精液品质检查： （1）常规检查：射精量，色泽 ，气味，云 雾状，pH值 （2）精子活率 （3）精子密度 （4）死活精子百分率 ⒉定期检查 ⑴精子计数（亿/毫升） ⑵死、活精子百分率测定 ⑶精子畸形率测定 ⑷精子顶体完整率的测定 ;3.精液稀释 ⒈营养剂：功能作用。主要是糖类（果糖、葡萄糖等单糖）以及卵黄和奶类（鲜全奶、脱脂奶或纯奶粉）等。 ⒉保???剂： ⑴缓冲剂：保证精液适宜PH值，利于精子的存活。如柠檬酸钠、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）等。 ⑵抗冷保护剂：如 新鲜卵黄、奶类。 ;⑶抗冻保护剂：可以提高精液冰点，少量渗入精子可降低冷冻损伤（减少冰晶形成），从而达到抗冻作用，如甘油和二甲基亚砜（DMSO，对精子的毒性较大） ⑷抗菌素类：抑制精液中和操作中带入的微生物的繁殖。如青霉素、链霉素、硫酸新霉素、林肯霉素、氨苯磺胺（结晶磺胺即外用消炎粉）等。 ;四、精液的保存技术 精液保存的目的是为了延长精子在体外的 存活时间，并通过远距离运输扩大精液的使用 范围，便于长途运输。 精液的保存按照保存温度可分为常温保存、 低温保存和冷冻保存三种。;（一）液态精液的保存技术 1.常温保存 常温保存法就是将稀释后的精液置于15~25 ℃温度范围内保存，亦称为室温保存或变温保存。 目前，主要应用于猪精液的保存。猪精液的保存温度为15℃～20℃。 ; 保存原理 * 常温保存主要是利用一定范围的酸性环境抑制精子的活动，或用冻胶环境来阻止精子活动，以减少其能量消耗，使精子保持在可逆性的静止状态而不丧失受精能力，在精液稀释液中加入弱酸类物质。 * 常温有利于微生物的生长，因此，还要用抗菌物质抑制微生物对精子的有害影响。此外，加入必要的营养和保护物质，隔绝空气，也会有良好的作用。; 保存方法 通常采用隔水降温处理，先将精液与稀释液在30℃ 同温下，按一定比例混合后，分装在贮精瓶内，密封后放入30℃ 温水容器内，然后在同容器放进15~25 ℃温水保温瓶内保存。 保存时要防止温度上升，保持相对稳定。也可将贮精瓶直接放在室内、地窖或自来水中保存。 保存期限：一般为数天（牛1～5d，马2～5d，猪3～5d ，绵羊1d ）。 ;2.低温保存 低温保存法就是将稀释后的精液置于0~5 ℃的低温条件下进行保存。 保存原理 * 低温保存主要是在抗冷剂的保护下，防止精子冷休克，缓慢降温至0~5 ℃保存，利用低温来抑制精子的活动，降低代谢和能量消耗，抑制微生物生长，同时加入必要的营养和其他成分，并隔绝空气，以达到延长精子存活时间的目的。;保存方法 冬季置于不结冰的室内（温度要符合要求） 其它季节可放在冰箱内或加有凉水的保温瓶内保存。 如果没有冰源，也可用化学制冷降温，或吊入水井深处保存。;精液低温保存的注意事项 降温速度不可过快（通常按0.2℃/min ）。 保存期间，尽量使温度保持恒定，避免升温。 低温保存的精液在镜检和