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DNA鉴定全过程.pdf

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DNA鉴定全过程

先上个度娘: 鉴定方法 DNA亲子鉴定的方法 : 1. DNA指纹法 DNA指纹指具有完全个体特异的 dna多态性, 其个体识别能力足以与手指指纹相媲美,因而 得名。可用来进行个人识别及亲权鉴定,同人 体核 DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位 点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图 纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称 为 DNA指纹 。 由于 DNA指纹图谱具有高度的变异性和稳定 的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成 为目前最具吸引力的遗传标记,可广泛用于亲 自鉴定。 特点: 1.高度的特异性:研究表明,两个随机个体 具有相同 DNA图形的概率仅 3×10^-11;如果同 时用两种探针进行比较,两个个体完全相同的 概率小于 5×10^-19。全世界人口约 50亿,即 5×10^9。因此,除非是同卵双生子女,否则几 乎不可能有两个人的 DNA指纹的图形完全相 同。 2.稳定的遗传性: DNA是人的遗传物 质,其特征是由父母遗传的。分析发现, DNA 指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双 亲之一的图谱中找到,这种带纹符合经典的孟 德尔遗传规律,即双方的特征平均传递 50%给 子代。 3.体细胞稳定性:即同一个人的不同 组织如血液、 肌肉、毛发、精液等产生的 DNA指纹图形完全一致。 2. STR检测,短串联重复序列( short tandem repeat, STR)又称微卫星 DNA( micro satellite DNA),是一类广泛存在于人类基因 组中的 DNA多态性基因座。它由 2~6碱基对构 成核心序列,呈串联重复排列。 STR基因位点 长度一般在 100~ 300 bp之间.因个体间 DNA 片断长度或 DNA序列差异而成高度多态性, 在基因传递过程中遵循孟德尔共显性方式遗 传。因其基因片段短、扩增效率高、判型准确 等特点,被称作第二代 DNA指纹,近几年亲 子鉴定多采用该方法。 3.SNP-单核苷酸多态性 SNP成为第三代遗传标志 ,人体许多表型差 异、对药物或疾病的易感性等等都可能与 SNP 有关。 4 RFLP分析法。 限制图谱标记和可见表型重组频率是可测量 的,将遗传图谱分为基因型和表型两种分子标 记。限制标记成为分子水平上测定遗传基因的 有力工具,也是因为它不受对表型有影响的基 因组变化。 r?p和 snp是连锁图谱的基础,对于亲子鉴定具 有重要的意义。许多使人致病的遗传性疾病我 们可以知道它在遗传图谱的哪一个位置,但是 还不知其对应的基因序列或者蛋白质,如囊性 纤维化病符合孟德尔遗传规律但是在该基因被 标注前,其突变体的分子本质是不知的。病人 和正常人的 dna限制图谱的比较中,我们常发 现其基因组中出现或者缺失特定的限制位点。 如果一个限制性标记与某个表型特征相连锁, 则该限制位点定位在该表性特征基因附近。鉴 定出该标记具有以下两种意义:提供了诊断疾 病的程序;为基因的分离提供了参考。 人类基因组频繁出现 snp,这对于绘制遗传图 谱是有帮助的。我们可以根据 snp的数量推断 出人类基因组中每一千到两千个碱基就有一个 snp。对于遗传疾病的基因的鉴定,就可以通 过对最近的 snp对其进行快速定位。 同样, r?p应用到遗传定位中,我们可以检测 未知位点与多态性片段的关系来定位。 r?p的出现为亲子鉴定的精确技术提供了基 础。对比 “父母和子女 ”的染色体适当位置的 r?p图谱,就可以精确判断其亲缘关系。 鉴定原理 鉴定亲子关系目前用得最多的是 DNA分型鉴 定。人的血液、毛发、唾液、口腔细胞等都可 以用于用亲子鉴定,十分方便。一个人有 23对 ( 46条)染色体,同一对染色体同一位置上的 一对基因称为等位基因,一般一个来自父亲, 一个来自母亲。如果检测到某个 DNA位点的 等位基因,一个与母亲相同,另一个就应与父 亲相同,否则就存在疑问了。 利用 DNA进行亲子鉴定,只要作十几至几十 个 DNA位点作检测,如果全部一样,就可以 确定亲子关系,如果有 3个以上的位点不同, 则可排除亲子关系,有一两个位点不同,则应 考虑基因突变的可能,加做一些位点的检测进 行辨别。 DNA亲子鉴定,否定亲子关系的准 确率几近 100%,肯定亲子关系的准确率可达 到 99.99%。 DNA(脱氧核糖核酸 )是人身体内

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