江西省血液中核心酸检测经验介绍.ppt

江西省血液中心核酸检测经验介绍;主要内容;江西省血液中心概况;中心重视科研工作，致力从临床输血治疗和开展新技术治疗的需求出发，开展了血液去除白细胞、血浆病毒灭活等新技术。2010年4月份，中心与北京、上海、广州等12个省市15所采供血机构一道，被卫生部列为我国内地首批核酸检测试点单位。此外，中心先后开展了骨髓移植配血、器官移植配型(基因法)、产前血型血清学检测、新生儿溶血病检测、亲子鉴定(基因法)等研究工作。 ;中心核心价值观;中心环境;标本交接离心区：用于核酸标本的接收、离心处理； 设备：大容量低温离心机2台 混样区：用于血液标本开盖、混样、以及质控品的加样； 设备：全自动混样仪HAMILTON STARIVD 2台、生物安全柜1台、 移动紫外车3台； 提取扩增检测区：用于核酸的提取、PCR扩增和检测。 设备：3套 COBAS? AmpliPrep+COBAS? TaqMan 、服务器1台、试剂暂存冰箱1台、移动紫外车3台 ;核酸检测实验室的设置;;全血标本 标本采集后4小时内进行离心处理。样本离心后先进行常规酶免检测，然后将酶免试剂阴性结果标本进行六混样核酸检测。如混样检测有反应性，再进行拆分检测。 机采标本 标本采集后4小时内进行离心处理； 加样模式：六混样（1机采标本+5全血标本）;核酸检测（酶免第一批阴性）;核酸检测阳性样本拆分实验;核酸检测的关键控制点—标本;核酸检测采血管的要求;标本留取细节解读;NAT标本溶血及影响;NAT标本脂血及影响;NAT标本中的其它影响因素;标本的运输;核酸标本离心细节解读;检测前准备;加样过程中凝块报错原因分析;核酸标本的采集、运送、处理和保存的关键点;核酸检测的关键控制点—防污染措施;易引发NAT检测污染的几个环节; 《基因扩增实验室管理办法》规定： ……在核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染……为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。;Roche cobas s 201系统防污染设计;移动紫外灯照射； 70%乙醇； 日常仪器和架子的维护清洁 新鲜配置的0.5%次氯酸钠溶液； 实验室工作台面和样本外溅时使用 实验室通风 ;温度在15-30度之间，超???这个范围仪器报警； 注意除湿，湿度不宜超过60%，超过这个湿度仪器故障率高。;核酸检测实验室检测管理;;2010年8月9日--2013年7月31日共完成177916份血液标本的核酸检测。其中拆分检测586次；拆分出390例酶免阴性而NAT阳性的标本，阳性率为0.22%。 鉴别阳性标本190例，其中188例为HBV阳性，另有1例HBV、HCV合并感染,1例HCV阳性。;检测常见现象分析;