荧光定量PC在R临床医学中应用.ppt

荧光定量PCR在临床医学中的应用;内容提要;基因诊断技术简介;4 基因诊断;PCR与基因诊断技术;荧光定量PCR技术;;荧光定量PCR技术的优点;Roche LightCycler;;荧光定量PCR技术的临床应用;乙型肝炎的病原检测;乙肝病毒;; HBV的感染过程;乙肝如何传染？;慢性HBV感染;慢性乙型肝炎;乙型肝炎肝硬化;HBsAg与抗HBs;HBsAg和抗HBs同时阴性： 即所谓窗口期，此时HBsAg和抗HBs都未产生。 HBsAg和抗HBs同时阳性： HBV感染恢复期，此时HBsAg未消失，抗HBs已产生。或者是亚型感染。 ;为什么HBsAg阴性不能排除HBV感染？;抗HBs阳性就万无一失了吗？;如何诊断血清HBsAg阴性的HBV感染？;HBeAg与抗HBe;HBeAg与抗HBe共存？;HBeAg水平与HBV DNA的关系;HBeAg阴性/抗HBe阳性/HBV DNA阳性;“两对半”缺陷;HBV DNA;HBV DNA检测的临床意义;　　 提供直接证据缩短“窗口期” ;HBV DNA检测的临床意义;HBV DNA检测方法;为什么建议病人要进行HBV DNA检测？;荧光定量PCR方法检测HBV感染的各期;;HBsAg和HBeAg均阳性而HBV DNA阴性？;乙肝的治疗;乙肝的治疗;拉米夫定;拉米夫定治疗人群;拉米夫定治疗效果;病毒学应答：HBV DNA低于检测下限 血清学应答 生化学应答 组织学应答;应用抗病毒药物后如何判断疗效？;YMDD变异;HBV-YMDD变异检测的临床意义;丙型肝炎的病原检测;丙肝病毒;抗HCV IgM和抗HCV IgG;HCV抗原检测的困难;HCV RNA;HCV RNA荧光定量PCR检测的临床意义;性病相关病原体的检测; 性病在我国已成为一个重要的公共卫生问题，自99年以来，性病的发生率居高不下，其发病率在传染性疾病中位居第3位，03年我国累计报道性病病例数（HIV除外）73万。浙江省为高发区，位居全国第三。;常见性传播疾病病原体;淋病双球菌的传统检测方法;荧光定量PCR检测NG的优势;沙眼衣原体;沙眼衣原体感染与致病;传统方法检测沙眼衣原体的缺陷;荧光定量PCR检测衣原体的优势;解脲支原体;UU难以分离，需特殊培养基培养，操作费时，需1-3天才能得到初步结果。 血清学检查，仅10%UU尿道炎患者在病程中特异性抗体滴度升高4倍，使其方法学应用受限。 一些非致病的脲原体或培养过程中的污染都可能导致假阳性的结果。 ;具有高度的敏感性和特异性，提高阳性检出率 快速、定量准确，???以为临床评价疗效提供依据; CT、UU是美国FDA批准的PCR检测试剂盒，作为首选方法，在临床推广应用;人类乳头瘤病毒;HPV;;传统巴氏涂片漏诊率可达30% 从细胞学水平来观察细胞的形态学改变，其中80%的患者确诊时已是宫颈癌晚期;早期感染的病原检测 可对HPV进行分型 可以评估病毒载量与患癌症风险 可以考核疗效与预后 用于HPV感染与生殖器肿瘤相关性的研究;人类免疫缺陷病毒;可判定无症状且血清阴性患者潜在的HIV传播性 检测长潜伏期的HIV携带者 使“窗口期”缩短10天 在治疗过程中观察患者血清HIV载量的变化预示病情的转归和指导临床用药 对于新生儿是否从母体感染HIV的诊断尤为适用;小结;对治疗过程进行疗效监测 指导用药过程及剂量，以制定合理的疗效方案 定量PCR的临床应用可结合临床表现，并与传统的免疫学、影像学等诊断方法来综合评判，更为科学 ; 04年6月，卫生部临检中心主任申子瑜、中国医科大学附属一院副院长尚红等专家对迪安医学检验中心的PCR基因诊断实验室进行验收，并顺利通过！; 谢 谢 大 家 ！