化妆品中绿脓杆菌的检验与鉴定1.doc

化妆品铜绿假单胞菌检验与鉴定若干问题的探讨 摘要　依照GB/T 7918.4—87标准对化妆品进行绿脓杆菌的检验，近期从不同类别的化妆品中检出四株铜绿假单胞菌及多株恶臭假单胞菌等假单胞菌。本文对铜绿假单胞菌检验与鉴定过程中应用十六烷三甲基溴化铵和乙酰胺作为选择性分离培养基，采用微量管手工鉴定与API 20NE、VITEK生化鉴定仪器鉴定进行比较，对不同鉴定方法出现的情况进行了分析和讨论。 关键词　铜绿假单胞　鉴定　分析 Discussion of Detection and Identification of Paeudomonas aeruginosa in Comestics Abstact According to Standards GB/T7918.4-87, we recently detected 4 Paeudomonas aeruginosa and several Pseudomonas putida in varied comestics. This article analysed the adoption of Cetrimide Agar and Acetamide Agar, comparing Synchron artificial identification and API 20NE as well as VITEK. Key words Paeudomonas aeruginosa Identification Analyisis 1　材料、仪器与方法 1.1 材料、仪器 样品来源：汕头口岸进出境的化妆品。 主要试剂：SCDLP液体培养基、十六烷三甲基溴化铵、乙酰胺等培养基，革兰氏染液等购自北京陆桥公司、绿脓杆菌微量生化鉴定管，购自广东环凯公司；氧化酶试剂、API 20NE测试条、VITEK　GN/GNI测试卡购自法国生物梅里埃公司。 仪器：VITEK-32型、VITEK　2　为法国生物梅里埃公司产品。 铜绿假单胞菌标准菌株：AS1.0212、AS1.2031，购自中国微生物菌种保藏中心；ATCC27853, 购自美国微生物菌种保藏中心。 1.2 检测方法 按GB/T 7918.4—87检验并予以改进。 2　鉴定结果 2.1　从不同类别的化妆品中检出了四株铜绿假单胞菌，多株恶臭假单胞菌、亲水假单胞菌、洋葱假单胞菌、浅黄假单胞菌等其它假单胞菌。将部分菌株鉴定结果列于下表： 菌株编号菌株 名称被检出化妆品 (类别)微量管手工鉴定结果 染 氧　 绿　 明　42℃　硝API20NE 鉴定结果VITEK 鉴定结果01铜绿假单胞菌洗发水 （清洁类）G-++++－99%铜绿假单胞菌96％铜绿假单胞菌02铜绿假单胞菌睫毛膏 （美容类）G-+－+++98.8%铜绿假单胞菌99%铜绿假单胞菌03铜绿假单胞菌洗面营养奶 （护理类）G-+++++99%铜绿假单胞菌99%铜绿假单胞菌04铜绿假单胞菌绿水 （玩具套装）G-+++++98.3%铜绿假单胞菌99%铜绿假单胞菌05恶臭假单胞菌粉饼 （美容类）G-+－－－－99.6%恶臭假单胞菌96％铜绿假单胞菌06铜绿假单胞菌标准菌株（对照） AS1.2031G-++－++99.6%铜绿假单胞菌99%铜绿假单胞菌注：染：染色镜检、氧：氧化酶试验、绿：绿脓菌素试验、明：明胶液化试验、42℃：42℃生长试验、硝：硝酸盐还原产气试验。G-:革兰氏阴性杆菌、+：阳性、－：阴性。 微量管手工鉴定、API 20NE测试条与VITEK仪器鉴定的结果：四株阳性菌株（上表编号01至04）是一致，均判定为铜绿假单胞菌；一株（上表中编号05）出现差异，该菌经手工鉴定是非绿脓杆菌的革兰氏阴性杆菌，经API 20NE测试条，反应数据由APWEB（V1.2.1）得出结果是恶臭假单胞菌，而VITEK仪器鉴定是铜绿假单胞菌。铜绿假单胞标准菌株（06号菌）与编号05号菌株在API与VITEK鉴定情况见下表： 菌株编号试验次数及分析API　20NE 生化谱 鉴定结果VITEK-32 生物码 鉴定结果VITEK 2 生物码 鉴定结果051生化谱0140457 99.6%恶臭假单胞菌，T值（0.96）生物码71600000440 96％铜绿假单胞菌0003051103501152 99％铜绿假单胞菌2生化谱0140457 99.6%恶臭假单胞菌，T值（0.96）生物码71600000440 96％铜绿假单胞菌0003051103501352 Low　Discrimination061生化谱