分子生物补充复习题.docx

分子生物化学补充复习题： 核酸可以分为哪二类，各自的主要分布场所？ 核酸分脱氧核糖核酸和核糖核酸两类，DNA主要分布在细胞核的染色质中（占95%），线粒体和叶绿体中也有（占5%）。RNA90%主要在细胞质中，10%存在与细胞核中。rRNA主要存在于核糖体。 核酸分子杂交和探针？ 分子杂交（molecular hybridization）指具有一定同原序列的两条核酸单链（DNA或RNA)在一定条件下通过碱基互补配对原则经退火处理形成异质双链的过程。 探针：已知序列的单链核酸片段 什么叫变性和复性？ 变性（denaturation）是指当核酸溶液受到某些物理或化学因素的影响，使核酸的双螺旋结构破坏，氢键断裂，变成单链，从而引起核酸理化性质的改变以及生物功能的减小或丧失。 复性(renaturation):导致变性的因素解除后，因变性而分开的两条单链即可再聚合成原来的双螺旋，其原有性质可得到部分恢复。此即为DNA复性。 Southern Blotting？5、Northern Blotting？6、Western Blotting？ Southern Blotting杂交是指DNA与DNA的杂交。Northern Blotting杂交是检测RNA的杂交。Western blotting 又称为蛋白质印记或免疫印记。 熔解温度(melting temperature, Tm)？ 指DNA双螺旋结构解开一半时的温度，决定于C-G碱基对的比例和DNA变性条件。 A、T、G、C、U的结构式？ 9、限制性内切酶？ 10、简述嘌呤核苷酸的分解代谢途径？ 腺嘌呤核苷酸及鸟嘌呤核苷酸有相应的5”-磷酸化酶催化，加水脱磷酸生成腺苷。腺苷经腺苷脱氨酶核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，次黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶作用变为黄嘌呤，鸟苷经核苷磷酸化酶作用生成鸟嘌呤，鸟嘌呤经鸟嘌呤脱氨酶作用生成黄嘌呤（嘌呤分解代谢共同中间产物），黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶作用变为尿酸。 简述嘧啶核苷酸的分解代谢途径？ 首先通过核苷酸酶及核苷磷酸化酶的作用，分别除去磷酸和核糖，产生的嘧啶碱再进一步分解。嘧啶的分解代谢主要在肝脏中进行。分解代谢过程中有脱氨基、氧化、还原及脱羧基等反应。胞嘧啶脱氨基转变为尿嘧啶。尿嘧啶和胸腺嘧啶先在二氢嘧啶脱氢酶的催化下，由NADPH＋H＋供氢，分别还原为二氢尿嘧啶和二氢胸腺嘧啶。二氢嘧啶酶催化嘧啶环水解，分别生成β－丙氨酸(β－alanine)和β-氨基异丁酸(β－aminosiobutyrate)。β－丙氨酸和β氨基异丁酸可继续分解代谢。β-氨基异丁酸亦可随尿排出体外。 尿嘧啶最终生成NH3、CO2及β-丙氨酸。胸腺嘧啶降解成β-氨基异丁酸。 12、简述嘌呤核甘酸与嘧啶核苷酸合成的异同点？ 嘌呤核苷酸与嘧啶核苷酸从头合成过程中，嘌呤核苷酸合成的原料是天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、CO2、一碳单位和PRPP。在5-磷酸核糖分子基础上逐步加合先形成嘌呤环，再逐步形成IMP，再转变成AMP 、GMP。主要在肝脏，其次是小肠黏膜和胸腺细胞合成。终产物IMP AMP GMP抑制PRPP合成酶和PRPP酰胺转移酶. 嘧啶核苷酸的合成原料是天冬氨酸、谷氨酰胺、CO2、PRPP、一碳单位、(仅胸苷酸合成)，在形成氨基甲酰磷酸的基础上先形成嘧啶环，再与磷酸核糖结合形成嘧啶核苷酸，其产物UMP 反馈抑制氨基甲酰磷酸合成酶II。PRPP合成酶即影响嘌呤核苷酸合成也影响嘧啶核苷酸合成。 简述嘌呤及嘧啶的补救合成途径及其意义？ 大多数细胞更新其核酸(尤其是RNA)过程中，要分解核酸产生核苷和游离碱基。细胞利用游离碱基或核苷重新合成相应核苷酸的过程称为补救合成。与从头合成不同，补救合成过程较简单，消耗能量亦较少。由二种特异性不同的酶参与嘌呤核苷酸的补救合成。腺嘌呤磷酸核糖转移酶催化PRPP与腺嘌呤合成AMP. 人体由嘌呤核苷的补救合成只能通过腺苷激酶催化，使腺嘌呤核苷生成腺嘌呤核苷酸。 嘌呤核苷酸补救合成是一种次要途径。其生理意义一方面在于可以节省能量及减少氨基酸的消耗。另一方面对某些缺乏主要合成途径的组织，如人的白细胞和血小板、脑、骨髓、脾等，具有重要的生理意义。 简述嘧啶核苷酸的从头合成调节上微生物与哺乳动物的差异？ 在细菌中，天冬氨酸氨基甲酰转移酶(ATCase)是嘧啶核苷酸从头合成的主要调节酶。在大肠杆菌中，ATCase受ATP的变构激活，而CTP为其变构抑制剂。而在许多细菌中、UTP是ATCase的主要变构抑制剂。 在动物细胞中，ATCase不是调节酶。嘧啶核苷酸合成主要由CPS-Ⅱ调控。UDP和UTP抑制其活性，而ATP和PRPP为其激活剂。第二水平的调节是OMP脱羧酶，UMP和CMP为其竞争抑制剂。 此外，OMP的生成受PRPP的影响。 15、什