005.薄層色譜法操作规程.doc

第-  PAGE 5 -页 SOP/QC(09)005－01 薄层色谱法操作规程 文件类别：标准操作规程 颁发部门分发部门份数分发部门份数质量管理部质量管理部人事行政部生产部工程部物料部销售部 审批表 签名部 门日 期制 订 人年 月 日审 核 人年 月 日批 准 人年 月 日生效日期年 月 日 江西中兴汉方药业有限公司 题 目薄层色谱法操作规程编 码SOP/QC(09)005-01 目 的 建立薄层色谱法标准操作规程。 适用范围 质量标准中规定的产品。 责 任 人 QC负责本规范的实施。 程 序 4.1简述 薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0502）系将供试品溶液点样于薄层板上，经展开、检视所得的色谱图，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用于药品的鉴别或杂质检查的方法。 4.2仪器与材料 4.2.1 薄层板 4.2.1.1 自制薄层板 除另有规定外，玻板要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。最常用的固定相有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H和硅胶HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254、烷基硅烷键合硅胶等。其颗粒大小一般要求直径为5~40μm 4.2.1.2 市售薄层板 分普通薄层板和高效薄层板，如硅胶薄层板、硅胶GF254薄层板、聚酰胺薄膜和铝基片薄层板等。高效薄层板的粒径一般为5~7μm。 4.2.2 点样器 有手动、半自动或自动点样器，手动点样时一般采用微量注射器或定量毛细管，应能使点样位置正确、集中。 4.2.3 展开容器 应使用适合薄层板大小的平底或双槽薄层色谱专用展开缸，并有严密的盖子。水平展开时使用专用水平展开缸。 4.2.4 显色剂 按各品种项下规定。可采用喷雾显色、浸渍显色或置适宜试剂的蒸气中熏蒸显色，检出斑点。 4.2.5 显色装置 喷雾显色可使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显色可用专用玻璃器皿或适宜的玻璃缸代替；碘汽熏碘显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的干燥器代替。 4.2.6 检视装置 为装有可见光、短波紫外光（254nm）、长波紫外（365nm）光源及相应滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄色谱图用，暗箱内光源应有足够的光照度。 4.3 操作方法 4.3.1 薄层板制备 4.3.1.1 自制薄层板 自制薄层板一般可分为无黏合剂和含黏合剂两种。 4.3.1.1.1 无黏合剂薄层板系将固定性直接涂布于玻璃板上，除另有规定外，将1份固定相和3份水，在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，置玻璃板上使涂布均匀，或倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2~0.3mm），取涂好的薄层板，置水平台上于室温下晾干后，在110℃活化30min，即置有干燥剂的干燥箱中备用。 4.3.1.1.2 含黏合剂的薄层板，除另有规定外，系将固定相中加入一定量的黏合剂，一般常用10%~15%煅石膏（CaSO4?H2O在140℃加热4h），混匀后加水适量，或用0.2%~0.5%羧甲基纤维素钠水溶液（取羧甲基纤维素钠适量，加入一定的水后，放置使溶胀，加热煮沸至完全溶解，放置，取上清液，即得）适量，在研钵中沿同一方向研磨混合调成糊状，去除表面的气泡后，同3.1.1.1，均匀涂布于玻璃板上。晾干，活化后，备用。 薄层板使用前应检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视），表面应均匀、平整、光滑，无麻点，无气泡，无破损及污染。 4.3.1.2 市售薄层板 临用前一般应在110℃活化30min。聚酰胺薄膜不需活化。铝基片薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的层板底边的硅胶层不得有破损，如在储放期间被空气中杂质污染，使用前可用适宜的溶剂在展开容器中上行展开预洗，110℃活化后，置干燥器中备用。 4.3.2 点样 除另有规定外，在洁净干燥的环境下，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，应能使点样位置正确、集中。点样基线距底边2.0cm（高效薄层板一般为0.8~1.0cm），样点直径为2~4mm（高效薄层板为1~2mm），点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，一般为1.0~2.0cm（高效薄层板可不小于5mm）。点样时必须注意勿损伤薄层板表面。 4.3.3 展开 展开缸如需预先用展开剂饱和可避免边缘效应。如需预饱和，可在缸中加入足够量的展开剂，必要时在壁上贴两条与缸一样高的宽滤纸条，一端浸人展开剂中，密封顶盖，一般保持15~30min，使系统平衡或按品种规定操作。 将点好供试品的薄层板迅速放人展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距