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第2章玻片标本制作技术
第二章 生物玻片标本制作技术 ;第一节 生物玻片标本制作方法;切取的标本;滴水;所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂 。
几个重要环节步骤如下:
(1)固定 其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似;必须对固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的等加以注意。
(2)冲洗
(3)脱水 酒精是最常用的脱水剂,把酒精配成不同梯度的浓度缓慢进行。
(4)染色
(5)浸蜡 将已透明的材料投入熔化的石蜡中,取代透明剂,使组织中空隙为石蜡透入而填满; ;(6)切片
用石蜡包埋块包埋的石蜡块,经修整后一般使用旋转式切片机进行切片;
(7)透明 透明在两种情况下进行。
第一,透明是在组织脱水后浸蜡前进行,其目的不在于为了显微镜观察,而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此,??明剂必须既能与酒精混合,又能与石蜡融合无间,二甲苯即具此性质,故被选为常用的透明剂。
第二,透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水剂进入封藏剂的桥梁外,尚有使标本透明而便于观察的作用。
(8)封藏
常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便于镜检。 ; 火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,也因火棉胶有韧性,切片不致有折卷或破裂,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片 。;是一种将游离的细胞,动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液,含有细菌的培养液以及精巢、花药等 ;悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料(如变形虫的运动、细菌的活动、花粉的萌发等)封闭在载玻片的小室里,供观察它们活动的一种玻片标本。 ;第二节 植物材料玻片标本制作技术;南瓜茎纵切片;二、常用实验孢子植物的制片方法
(一) 衣藻装片
(二) 团藻装片
;藓原丝体装片;第三节 动物材料玻片标本制作技术;果蝇唾液腺染色体;人类脊髓神经细胞
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