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实验九人体X_染色质的观察
实验九人类X染色质的观察;一、实验目的;1. X-染色质的发现
1949年M.L.Barr等研究发现:
雌猫神经元细胞间期核内——凝缩的深染小体。
进一步发现:其它雌性哺乳动物(包括人类)也同样有这种结构。
而且在其它细胞的间期核中也可以见到这一结构,称之为Barr小体(巴氏小体)。
研究表明,巴氏小体是X染色体异固缩的结果,也称为X染色质或X小体,在细胞周期中比有活性的X染色体复制稍晚。;2.莱昂氏假说 (Lyon hypothesis);3.剂量补偿效应 (dosage compensation);4.莱昂氏假说的修正(新莱昂氏假说); 5. X染色质检查的应用;三、实验材料、器具和药品;四、实验方法;2. 发根毛囊细胞的X染色质(Barr小体)显示方法
⑴取材:拔取女性带毛囊细胞的头发,置于载玻片上;
⑵固定:在毛囊上滴加一滴45%的醋酸(或5mol/L盐酸)
固定5min,吸掉多余的醋酸;
⑶染色:用镊子将软化的毛囊剥下,加一滴石炭酸品红
染色2~3min;
⑷制片:盖上盖片,垫上滤纸用拇指压片;
⑸镜检:低倍→高倍。;X染色质的辨别:;X染色质是一结构致密的浓染小体,轮廓清楚,大小1~1.5μm ;
形态:微凸形、三角形、卵形、短棒形等,常附于核膜边缘或靠近内侧。 ;箭头所示为巴氏小体
(女性细胞[左]中存在,男性细胞[右]中没有);从理论上讲,正常女性的间期细胞中都应该有一个X染色质,但事实上由于个体的生理状态、染色方法、染色技术以及X染色质在细胞核中的位置不同,实际检查中不可能在每个细胞中都看到。
正常女性间期细胞核中X染色质阳性率一般约为10~30%,有的可高达50%以上,在男性间期细胞核中则平均低于1%。;六、作业
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