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Bradford Protein Assay Kit (5 x) Bradford 蛋白质定量试剂盒 货号：E161-01 规格：100 ml 5 x 浓缩液 保存： ℃ 4 运输：4~25℃ 【产品概述】 Bradford 蛋白质定量试剂盒系根据 Bradford 染料结合原理，利用考马斯亮蓝 G-250 染料可与蛋白质结合（主要结合碱性或芳 香族氨基酸残基），形成蓝色复合物的特性，通过测定样品在 595 nm 波长下的吸光值，并同 BSA 标准品所绘制的定量标准曲 线做比对，即可计算出待测样品的蛋白质浓度。该方法可测定分子量在 3000 以上的多数蛋白和多肽浓度，具有灵敏度高、操 作简便、快速、价格低廉等特点，是目前实验室最常用的蛋白质粗略定量方法。由于 Bradford 测定法会受样品中的一些试剂， 特别是去垢剂的干扰（见附表），故使用时应先排除干扰因素。 【产品组分及保存条件】 组分 总量 保存条件 5x Bradford Protein Assay Reagent 100 ml (约500次标准法) 4℃或室温保存一年 BSA Protein Standard (10 mg/ml) 2 ml -20℃保存一年；4℃保存六个月 【使用方法】 I． 比色杯法 A. 标准法 (线性范围：100~1000 μg/ml；反应总体积：1.02 ml) 1． 制备1x Bradford工作液：根据标准品和待测样品的数量，用去离子水将适量的5x Bradford Protein Assay Reagent按 1:5 稀释； 2． 配制BSA Protein Standard反应溶液：用去离子水将BSA Protein Standard稀释成不同浓度 (如：0，100, 200, 400, 800, 1000 μg/ml)，以制作标准曲线； 3． 分别取20 μl各个待测样品或步骤[2]中所配制的BSA Protein Standard稀释液与1 ml 1x Bradford工作液均匀混合，加入 比色杯中； 4． 室温静置5分钟 (注：请勿超过1小时)； 5． 使用分光光度计检测BSA Protein Standard的 595 nm吸光值并绘出标准曲线； 6． 检测待测样品的 595 nm吸光值，并依据步骤[5]所绘出的标准曲线换算出待测蛋白样品的浓度。 B. 微量法 (线性范围：1~20 μg/ml；反应总体积：1 ml) 1． 配制BSA Protein Standard反应溶液：用去离子水将BSA Protein Standard稀释成1 mg/ml；按下表配制不同浓度的 BSA Protein Standard，以制作标准曲线； BSA终浓度 (μg/ml) 0 1 5 10 15 20 5 x Bradford Protein Assay Reagent (μl) 200 200 200 200 200 200 1 mg/ml BSA (μl)