Luc-PairDuo-LuciferaseHTAssay.PDF

Luc-Pair ? Duo-Luciferase HT Assay Kit —稳定型双荧光素酶检测试剂盒 Cat. No. LF013 (10ml,75μl×120 reactions for 96-well plate;20μl×480 reactions for 384-well plate) Cat. No. LF014 (30ml,75μl×360 reactions for 96-well plate;20μl×1440 reactions for 384-well plate) Cat. No. LF015 (100ml,75μl×1200 reactions for 96-well plate;20μl×4800 reactions for 384-well plate) 使用说明书 GeneCopoeia, Inc. 广州易锦生物技术有限公司 9620 Medical Center Drive, #101 地址：广州科学城揽月路 3 号 F 区 F 801（510663） Rockville, MD 20850 电话： 4006-020-200、 020 020USA 网站： 301-762-0888 866-360-9531 inquiry@ ? 2017 GeneCopoeia, Inc. Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit 使用说明书 使用说明书 Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit I. 产品概述 II. 产品信息及储存条件 III. 准备细胞样品 IV. FLuc 和 RLuc 工作液的配制 V. 荧光素酶检测流程 VI. 有限使用许可及质保声明 I. 产品概述 对报告基因表达的转录调控的研究常被应用于生物学研究和药物发现。荧光素酶在基因表达研究中应用最为广泛，其主要包含以下 几个优点： 1) 在广泛动态范围内具有高灵敏度 2) 在哺乳动物细胞内无荧光素酶、 背景极低 3) 实验重复性好 4) 成本低 5) 操作简单 萤火虫和海肾荧光素酶都具有快捷、简便、灵敏度高的检测特点，被公认为是理想的报告基因，因为它们具有完全不同的进化起源、 酶学结构和底物要求。萤光素酶报告基因的测定需要用光度计或多功能微孔板检测仪，且发光强度与荧光素酶的数量成正比。 萤火虫荧光素酶（Photinus pyralis）已被证实是检测启动子活性和监测基因转录后调控状态的理想的报告基因。它是在细胞质中作 用的酶，分子量为 61 kDa 并催化下列反应： 2 Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit 使用说明书 海肾（Renilla reniformis）荧光素酶是一个 36 kDa 单亚基蛋白质，酶活性不需要翻译后修饰，因此它可以作为一个实时转录报告 基因，催化下面的生物发光反应： GeneCopoeia 充分利用了萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶结构和底物的不同，优化并开发了简便/快速的检测体系可以方便连续地 从一个样品中定量测定两种荧光素酶的活性。 The Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit 提供的试剂可直接用于培养基中的细胞， 无需预处理或预裂解细胞，两种酶活性的检测可以依次在同一样品里检测出。细胞裂解与萤火虫荧光素酶的检测可以在第一种试剂加入 后同时进行，而后加入 的第二种试剂可同时淬灭萤火虫荧光素酶的荧光同时激发海肾荧光素酶酶的荧光。本试剂